Rozwarstwienie kompleksu oko-mózg z poczwarek much: metoda izolacji tkanki siatkówki

0 views • 2:52 min • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- Na początek zabezpiecz poczwarkę muszki owocowej grzbietem lub tyłem do góry. Usuń wieczko lub przedni koniec poczwarki, aby odsłonić głowę zwierzęcia. Kontynuuj otwieranie poczwarki, odcinając i odrywając osłonkę. Po uwolnieniu przykryj rozciętą poczwarkę PBS, aby uniknąć wysuszenia. Wykonaj czyste cięcie w przekroju poprzecznym przez klatkę piersiową i usuń tylną część tuszy.

Aby odsłonić kompleks oko-mózg, który obejmuje dwie siatkówki przyczepione do płatów wzrokowych, zacznij odrywać nabłonek od rozciętej krawędzi klatki piersiowej i kontynuuj stopniowe otwieranie torebki głowy. Następnie ostrożnie poprowadź kompleks oko-mózg z dala od resztek torebki głowy.

W przykładowym protokole zobaczymy demonstrację rozwarstwienia oka i mózgu poczwarki używanej do izolowania tkanki do różnych dalszych analiz.

- Po umieszczeniu poczwarek Drosophila na czarnym naczyniu preparacyjnym, połóż świeży kawałek taśmy dwustronnej na naczyniu preparacyjnym z dala od poczwarek i użyj kleszczy, aby ostrożnie umieścić poczwarkę grzbietową stroną do góry na taśmie.

Umieść naczynie pod mikroskopem stereoskopowym i użyj kleszczy, aby usunąć wieczko z każdej poczwarki. Użyj nożyczek do mikrodysekcji, aby przeciąć każdy przypadek poczwarki, umożliwiając jego rozwarcie, aby odsłonić głowę, klatkę piersiową i przedni segment brzucha, a także przymocuj krawędzie etui poczwarki do dwustronnej taśmy.

Przebij brzuch każdej poczwarki ostrymi kleszczami i wyjmij poczwarkę z etui poczwarki. Umieść poczwarkę na naczyniu preparacyjnym z dala od taśmy i przykryj poczwarkę 400 mikrolitrami lodowatego PBS. Użyj kleszczy, aby chwycić każdy z nich za brzuch i użyj nożyczek do mikrodysekcji, aby wykonać jedno czyste nacięcie w przekroju poprzecznym przez klatkę piersiową, przecinając poczwarki na pół.

Za pomocą dwóch par cienkich kleszczy chwyć przecięte krawędzie każdego nabłonka klatki piersiowej i stopniowo rozerwij torebkę klatki piersiowej i głowy, odsłaniając kompleks oko-mózg w otaczającej tkance tłuszczowej. Następnie, nie chwytając tkanki, użyj kleszczy, aby skierować każdy półprzezroczysty, białawy kompleks oko-mózg w kształcie hantli z dala od resztek torebki głowy.

11:58

Rozwarstwienie i immunohistochemia siatkówki larw, poczwarek i dorosłych osobników Drosophila

Related Videos

0 Views

09:54

Obrazowanie na żywo oka poczwarki Drosophila

Related Videos

0 Views

07:48

Wypreparowanie i montaż krążków ocznych poczwarki Drosophila

Related Videos

0 Views

09:12

Obrazowanie na żywo migracji komórek glejowych w dysku imaginalnym oka Drosophila

Related Videos

0 Views

07:37

Brama do mózgu: preparacja oka naczelnych

Related Videos

0 Views

16:47

Przygotowanie rozwijających się i dorosłych mózgów i siatkówk Drosophila do obrazowania na żywo

Related Videos

0 Views

09:01

Mikrodysekcja embrionalnych tkanek oczu danio pręgowanego

Related Videos

0 Views

05:16

Pojedyncze rozwarstwienie i obrazowanie Drosophila ommatidium

Related Videos

0 Views

07:49

Przygotowanie oczu dorosłych Drosophila do cienkiego przekroju i analizy mikroskopowej

Related Videos

0 Views

03:49

Drosophila Sekcja mózgu osoby dorosłej: metoda w neurobiologii much

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026