Pobieranie szpiku kostnego z tylnej kończyny myszy

- Szpik kostny to gąbczasta galaretowata tkanka znajdująca się w pustym środku kości. Zawiera hematopoetyczne komórki macierzyste, które wytwarzają komórki krwi, kluczowy składnik układu odpornościowego. Izolacja szpiku kostnego od większych kości, takich jak kość udowa i piszczelowa, zapewnia wysoką wydajność komórek.

Aby pobrać szpik kostny, umieść uśpioną mysz w pozycji leżącej na plecach i wysterylizuj skórę za pomocą etanolu. Przetnij jamę brzuszną i usuń skórę, aby odsłonić tylne kończyny. Złam kość piszczelową, długą kość nogi, i umieść ją w zimnym PBS, aby utrzymać warunki fizjologiczne. Zwichnij rzepkę i usuń mięśnie, aby odsłonić kość udową, kość udową.

Odetnij kość udową od spodu kości i umieść w zimnym PBS. Wybij otwór w probówce do mikrowirówek o mniejszej objętości i umieść w niej obie kości tak, aby kości były otwarte skierowane w stronę otworu. Umieść probówkę zawierającą kości w probówce do mikrowirówek o większej objętości i odwiruj dwuwarstwowe probówki w celu osadzenia szpiku kostnego. Pobrany szpik kostny należy wykorzystać do dalszej analizy. W tym protokole pobierzemy szpik kostny z tylnych kończyn myszy.

- W celu pobrania szpiku kostnego umieść 6-10-tygodnio