JoVE Encyclopedia of Experiments
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 3:56 min • April 30th, 2023
- Szpik kostny, czyli gąbczasta tkanka wewnątrz większości kości, jest głównym miejscem tworzenia się komórek krwi. Analiza komórek szpiku kostnego pomaga w dokładnej diagnozie wielu zaburzeń związanych z krwią, takich jak białaczka. Tylny górny kręgosłup biodrowy jest łatwo dostępnym miejscem i bogatym źródłem szpiku kostnego.
Aby uzyskać aspiracje szpiku kostnego, należy ułożyć pacjenta w bocznej pozycji odleżynowa. Zdezynfekować i znieczulić zamierzone miejsce aspiracji. Włóż igłę aspiracyjną i przeprowadź ją przez skórę, tkankę podskórną i kość korową, aby uzyskać dostęp do gąbczastej kości gąbczastej zawierającej szpik kostny.
Wyjąć trzpień z igły i założyć pustą strzykawkę. Odessać szpik kostny. Przenieść część aspiratu do probówki zawierającej antykoagulant w celu przechowywania bez krzepnięcia krwi. Przenieś pozostały aspirat do szkiełka zegarka.
Zlokalizuj maleńkie skupiska komórek szpiku kostnego lub kolce i przenieś je na szklane szkiełko. Delikatnie przesuń drugi szkiełko po spikuli, aby utworzyć smugę. Wysuszyć i wybarwić rozmaz do badania morfologicznego komórek szpiku kostnego. Poniższy protokół przedstawia aspirację próbki szpiku kostnego z tylnego górnego odcinka biodrowego kręgosłupa pacjenta z ostrą białaczką szpikową w celu oceny morfologicznej komórek.
- Gdy pacjent znajduje się w bocznej pozycji odleżynowej, należy oznaczyć długopisem górny tylny odcinek biodrowy kręgosłupa i zdezynfekować skórę w miejscu zamierzonej biopsji 0,5% do 1% chlorheksydyny w etanolu ruchem okrężnym na zewnątrz. Po podaniu znieczulenia miejscowego podnieś igłę o rozmiarze 15 x 2,8 cala z bliższym końcem w dłoni i palcem wskazującym przylegającym do boku metalowego trzonka igły w pobliżu końcówki w celu kontroli. Używając delikatnego, ale mocnego nacisku, wprowadź igłę szybkim, naprzemiennym ruchem pronacji/supinacji przez znieczuloną skórę w kierunku kręgosłupa biodrowego.
Gdy igła zetknie się z tylnym kręgosłupem biodrowym, wyjmij sztyft i przymocuj do igły pustą strzykawkę o pojemności 10 mililitrów. Delikatnie wycofać tłok, aby wytworzyć podciśnienie w strzykawce do momentu pobrania do 10 mililitrów kolców szpiku kostnego.
- Nie należy przyjmować więcej niż 10 mililitrów szpiku kostnego na aspirat, aby uniknąć hemodilutacji.
- Wyjąć strzykawkę i umieścić trzpień z powrotem na igle. Następnie wyrzuć około 2 mililitry szpiku do szkła zegarka i upewnij się, że pobrano wystarczającą ilość próbki, aby wstrzyknąć ją do 8-mililitrowej probówki pokrytej heparyną, a następnie natychmiast odwróć probówkę.
- Aby zapobiec krzepnięciu, ważne jest, aby odwrócić rurkę zawierającą antykoagulant zaraz po dodaniu szpiku kostnego.
- Aby uzyskać optymalną ocenę morfologiczną, za pomocą plastikowej szpatułki przenieś kolce z aspiratu w szkiełku zegarkowym na szkiełko podstawowe i ostrożnie nasuń kolejny szkiełko na szkiełko. Po wyschnięciu wybarwić kolce preparatem May-Grünwald-Giemsa do analizy za pomocą mikroskopu świetlnego. Umieść rurkę szpiku kostnego w plastikowym uchwycie i umieść uchwyt w plastikowym pojemniku z wkładem żelowym i wypełnionym formularzem wniosku.