JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuronauka
0 wyświetleń • 1:20 min • March 4th, 2025
Zacznij od szklanego szkiełka zawierającego zatopiony w parafinie wycinek tkanki mózgowej od starszego psa.
W tkance widoczne są fibryle amyloidowe i nieprawidłowe agregaty białkowe w ścianach naczyń mózgowych, które są kluczowymi wskaźnikami zaburzeń neurologicznych.
Zanurz szkiełko w ksylenie, aby usunąć parafinę, a następnie przepłucz je alkoholem w celu usunięcia ksylenu.
Następnie kolejno zanurz szkiełko w malejącym stężeniu alkoholu. Proces ten nawilża wycinek tkanki i zwiększa jego przepuszczalność dla barwienia.
Zastosuj czerwony barwnik Kongo, który wiąże się z wysokim powinowactwem do struktury beta-arkuszowej włókien amyloidowych, zapewniając wyraźny czerwony kolor.
Opłucz sekcję wodą, aby usunąć niezwiązane barwniki.
Na koniec należy zastosować podstawowy barwnik hematoksylinowy, który selektywnie barwi jądra komórkowe na niebieski kolor. Umyj, aby usunąć nadmiar plam.
Pod mikroskopem gęste, zabarwione na czerwono obszary w ścianach naczyń mózgowych potwierdzają obecność włókienek amyloidowych, charakterystycznych dla mózgowej angiopatii amyloidowej.