JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuronauka
0 wyświetleń • 1:20 min • March 4th, 2025
Weź neuronalne komórki macierzyste lub NSC i komórki śródbłonka mikronaczyniowego mózgu lub BMEC w pożądanym stosunku.
Zawiesić mieszaninę komórkową w macierzy zewnątrzkomórkowej lub roztworze ECM.
Rozprowadź mieszaninę na dnie naczynia konfokalnego i inkubuj.
ECM polimeryzuje, tworząc trójwymiarowe rusztowanie, które umożliwia adhezję komórkową.
Rozprowadzić warstwę NSC w roztworze ECM na zestalonej warstwie.
Inkubować w celu polimeryzacji ECM. Naśladuje to warstwową tkankę mózgową, wzmacniając interakcje komórka-komórka.
Dodaj pożywkę i inkubuj.
Czynniki wzrostu w pożywce sprzyjają proliferacji komórek, jednocześnie ułatwiając BMEC organizowanie się w sieci podobne do naczyń krwionośnych, tworząc jednostkę nerwowo-naczyniową lub NVU.
Zastąp pożywkę pożywką zawierającą witaminę A, ułatwiając różnicowanie NSC w neurony i komórki glejowe.
Komórki w NVU są spontanicznie łączone w modułową organizację replikującą mikrośrodowisko podobne do mózgu.