JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuronauka
0 wyświetleń • 1:29 min • March 4th, 2025
Weźmy chemicznie utrwalone skrawki mózgu uzyskane z mysiego modelu choroby Alzheimera.
Sekcje te zawierają splątki neurofibrylarne - nieprawidłowe agregaty białka tau znajdujące się w neuronach hipokampa.
Umyj sekcje buforem, a następnie wodą dejonizowaną.
Potraktuj kwasem okresowym w celu utlenienia grup glikozylowych związanych z agregatami, tworząc grupy aldehydowe.
Umyć wodą dejonizowaną i dodać alkaliczny roztwór jodku srebra. Jony srebra tworzą kompleksy z aldehydami, tworząc miejsca zarodkowania.
Przemyć rozcieńczonym słabym kwasem, aby usunąć niezwiązane srebro i zneutralizować pH.
Spłucz wodą dejonizowaną.
Dodaj schłodzony roztwór wywoływacza zawierający środek redukujący, aby przekształcić jony srebra w srebro metaliczne, nadając bladobrązowy kolor.
Spłucz rozcieńczonym słabym kwasem, aby zatrzymać rozwój.
Zamontuj sekcje, odwodnij je za pomocą zwiększającego stężenia alkoholu i nałóż środek montażowy.
Uszczelnij sekcje szkiełkiem nakrywkowym.
Za pomocą mikroskopu świetlnego wizualizuj splątki neurofibrylarne.