JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 1:23 min. • March 4th, 2025
Weźmy chemicznie utrwalony mózg myszy poddanej chronicznemu stresowi.
Stres upośledza funkcję oligodendrocytów, zaburzając bogatą w lipidy osłonkę mielinową otaczającą aksony neuronów w przyśrodkowej korze przedczołowej, regionie mózgu regulującym emocje.
Ponownie nałóż utrwalacz, aby zachować architekturę tkanki. Zanurz tkankę w krioprotektantu, aby zastąpić wodę, zapobiegając tworzeniu się kryształków lodu podczas zamrażania.
Zamroź mózg, a następnie pokrój go na plasterki koronalne.
Zamontuj plastry na szkiełkach, a następnie nawodnij je w wodzie, aby zwiększyć penetrację plam.
Podgrzej plastry w roztworze zawierającym jony złota. Jony te selektywnie wiążą się z lipidami w osłonce mielinowej i tworzą metaliczne złogi złota, znakując mielinizowane neurony.
Podgrzej środkiem redukującym, aby zredukować nadmiar jonów złota, a następnie spłucz, aby je usunąć i odwodnić tkankę za pomocą zwiększającego stężenia alkoholu.
Użyj ksylenu, aby zwiększyć przezroczystość tkanki i zamontuj szkiełka.
Za pomocą mikroskopii wizualizuj zabarwione złotem mielinizowane neurony i oceń zmiany wywołane stresem.