JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:24 min. • August 29th, 2025
Rozpocznij od sterylnego zestawu do mikroiniekcji wypełnionego wodą, składającego się ze strzykawki podłączonej do mikrowstrzykiwacza za pomocą plastikowej rurki.
Lekko cofnąć tłok strzykawki, aby w rurce powstał pęcherzyk powietrza.
Zanurzyć końcówkę mikrowstrzykiwacza w środku terapeutycznym i pociągnąć tłok, aby zassać roztwór.
Weźmy obudzonego szczura z ochronną nasadką na głowę i dwiema wstępnie wszczepionymi kaniulami prowadzącymi wprowadzonymi do określonych docelowych obszarów mózgu.
Przyłóż klatkę piersiową szczura do klatki piersiowej eksperymentatora, aby zminimalizować stres.
Oczyść obszar wokół kaniul sterylnym roztworem.
Włóż mikrowstrzykiwacze z lekiem do kaniul prowadzących, aby dotrzeć do miejsc docelowych.
Rozpocznij infuzję leku i monitoruj jego dostarczanie, śledząc ruch pęcherzyków.
Po zakończeniu wstrzykiwania należy przytrzymać krótko, a następnie wyjąć mikrowstrzykiwacze. Włóż obturatory do kaniul, aby zapobiec zanieczyszczeniu.
Metoda ta umożliwia celowe dostarczanie środków terapeutycznych do mózgu gryzoni.
Odciągnąć tłok strzykawki o 0,2 mikrolitra, aby utworzyć pęcherzyk między sterylną wodą a rurką PE 20 a roztworem, który ma być wstrzyknięty.
Następnie umieścić mikrowstrzykiwacz w odczynniku, który ma być wstrzyknięty i powoli pociągnąć tłok strzykawki do blokady. Aby przygotować zwierzę do wstrzyknięcia, przyłóż klatkę piersiową szczura do klatki piersiowej eksperymentatora. Oczyść obszar wokół kaniuli bawełnianym aplikatorem nasączonym Betadine.
Przetrzyj nasadkę głowy trzy razy Betadine, a następnie dwukrotnie przetrzyj ją etanolem. Następnie umieść napełniony mikrowtryskiwacz w kaniuli. Naciśnij start na pompie mikrowtryskowej i monitoruj ruch pęcherzyków.
Po zakończeniu wstrzykiwania wyjmij mikrowstrzykiwacz z kaniuli i zastąp go obturatorem.