Mikrowstrzyknięcie tetrodotoksyny do mózgu obudzonej samicy szczura w celu zahamowania owulacji

Weź mikrostrzykawki wypełnione wodą destylowaną i podłącz je do rurek połączonych z mikrowstrzykiwaczami.

Naciskać tłoki mikrostrzykawki, aż na końcach mikrowstrzykiwaczy pojawi się kropla wody, a następnie lekko cofnąć tłoki, aby utworzyć kieszeń powietrzną w rurkach.

Umieść na nich podkładki nasączone substancją dezaktywującą toksyny i foliami parafinowymi.

Pipetować tetrodotoksynę na parafilm i zassać go do mikrowstrzykiwaczy.

Zamontować mikrostrzykawki na pompie do mikroiniekcji i przesuwać tłoki, aż na końcach mikroiniekcji pojawi się kropla. Wyrzuć krople.

Przytrzymaj przytomną samicę szczura za pomocą kaniul prowadzących wszczepionych w podwzgórze.

Włóż mikroiniektory do kaniul prowadzących.

Wykonać mikroiniekcję.

Tetrodotoksyna blokuje kanały sodowe w neuronach podwzgórza, zapobiegając wypalaniu neuronów.

To hamowanie hamuje neurony wydzielające hormon uwalniający gonadotropiny, hamując w ten sposób owulację.

Pozostaw mikrowtryskiwacze na miejscu, aby zapobiec przepływowi wstecznemu. Następnie zdejmij je i załóż zaślepki na kaniule prowadzące.

Skonfigurować pompę do mikroiniekcji w zależności od szybkości infuzji i całkowitego czasu wstrzyknięcia. Następnie napełnij 2 10-mikrolitrowe