JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:30 min. • September 26th, 2025
Weź metabolicznie aktywną kulturę Mycobacterium marinum. Zapewnia to wysoką żywotność bakterii i optymalny stan fizjologiczny.
Odwirować kulturę, aby osadzać bakterie.
Odrzucić nadmiar supernatantu i ponownie zawiesić osad w świeżych pożywkach zawierających środek dyspergujący.
Przenieść zawiesinę do probówek mikrowirówkowych i poddać sonizacji w kontrolowanych warunkach.
Sonikacja rozbija agregaty bakteryjne i rozprasza komórki, w wyniku czego powstaje żywotna zawiesina jednokomórkowa.
Zebrać sonikowaną zawiesinę do strzykawki i przepuścić ją przez filtr membranowy, aby usunąć wszelkie pozostałe grudki, zapewniając jednolitą populację pojedynczych komórek.
Za pomocą spektrofotometru zmierz gęstość optyczną zawiesiny bakteryjnej.
Rozcieńczyć zawiesinę świeżą pożywką zawierającą krioprotektant, aby osiągnąć pożądane stężenie bakterii przy jednoczesnym zachowaniu żywotności komórek.
Podzielić na porcje końcową zawiesinę jednokomórkową i przechowywać ją w bardzo niskich temperaturach. Krioprotektant pomaga utrzymać żywotność bakterii podczas długotrwałego przechowywania.
Po zaszczepieniu zgodnie z manuskryptem, odwirować kulturę w temperaturze 3000 razy G przez 10 minut, aby zebrać Mycobacteri
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych