Zachowanie rojowe Pseudomonas aeruginosa pod wpływem stresu antybiotykowego

Umieść płytkę agarową na wydrukowanym szablonie, aby wyrównać środek i sześć równomiernie rozmieszczonych plamek satelitarnych.

Na środku talerza znajdź zdrową kulturę Pseudomonas aeruginosa.

Umieść mieszaninę tej samej kultury z antybiotykiem na miejscach satelitarnych.

Przykryj talerz czarną pokrywką, aby zmniejszyć odbicia światła.

Umieść go na skanerze w inkubatorze o stałej temperaturze i wilgotności, aby utrzymać wzrost bakterii.

Zdrowe bakterie w centrum rosną i rozprzestrzeniają się na zewnątrz w postaci przypominających wąsy wzorów roju, które promieniują po powierzchni agaru.

Bakterie zmieszane z antybiotykiem ulegają stresowi i uwalniają sygnały chemiczne, które dyfundują przez agar.

Gdy rój dociera do tych stref, wyczuwa sygnały stresu.

Wywołuje to reakcję unikania, przekierowując wzrost bakterii z dala od regionów narażonych na działanie antybiotyków.

Obrazowanie poklatkowe pokazuje wzrost bakterii i zmiany w ekspansji roju pod wpływem stresu antybiotykowego.

W celu powlekania roju agaru, przytrzymaj końcówkę pipety P20 załadowaną pięcioma mikrolitrami z nocnej kultury P. aeruginosa pod kątem 10-45 stopni 2-1/2 centymetra powyżej środka jednej płytki rojowej i wciśnij tłok do p