JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:45 min. • September 26th, 2025
Weźmy chipy mikroprzepływowe z komorami wzrostu i leków oddzielonymi zaworem mikromechanicznym.
Załaduj zmutowane szczepy E. coli typu dzikiego i odporne na TMP, zawieszone w pożywkach, do komór wzrostowych pod ciśnieniem, gdzie testowanym antybiotykiem jest trimetoprim (TMP).
Następnie należy załadować komory lekowe pożywką zawierającą niskie stężenie TMP, aby wywołać stres komórkowy u bakterii.
Uruchomić zawór mikromechaniczny, aby umożliwić dyfuzję TMP do komór wzrostowych, umożliwiając wnikanie TMP do bakterii.
Umieść chipy w inkubatorze zamontowanym na stoliku mikroskopu odwróconego i rozpocznij obrazowanie poklatkowe.
W dzikim typie E. coli TMP wiąże się z enzymem reduktazą dihydrofolianową, zapobiegając wiązaniu dihydrofolianu i powodując filamentację wywołaną stresem oraz zmniejszone namnażanie się bakterii.
Jednak zmieniona struktura DHFR zmutowanego szczepu zapobiega wiązaniu TMP, umożliwiając normalne namnażanie.
Przyjrzyj się zdjęciom poklatkowym.
Dziki szczep E. coli wykazuje filamentację i zmniejszone namnażanie pod wpływem TMP, podczas gdy zmutowany szczep wykazuje normalną morfologię i namnażanie, co wskazuje na oporność na antybiotyki.
Po rozmrożeniu codziennie zamrożonej p
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych