JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:24 min. • October 30th, 2025
Weźmy na przykład bakterie typu dzikiego i bakterie zmutowane, które nie mają specyficznego genu reagującego na metale obecnego w typie dzikim.
Bakterie są hodowane w pożywkach zubożonych w metale, aby wyczerpać ich wewnętrzne rezerwy metali.
W tym środowisku zubożonym w metale gen reagujący na metal u bakterii typu dzikiego jest aktywowany i wyraża receptor powierzchniowy, którego nie ma u zmutowanych bakterii.
Rozcieńczyć kultury, aby zapewnić jednolitą gęstość komórek.
Weź płytkę wielodołkową zawierającą kompleks metal-białko.
Dodaj rozcieńczone kultury do studzienek.
Inkubować płytkę wewnątrz czytnika płytek utrzymywanego w kontrolowanej temperaturze z potrząsaniem, aby zapewnić optymalny wzrost bakterii.
Mierz absorbancję w regularnych odstępach czasu, aby monitorować wzrost bakterii w czasie.
U bakterii typu dzikiego receptor metalu umożliwia ekstrakcję jonu metalu z kompleksu, wspomagając jego wzrost.
Zmutowane bakterie wykazują ograniczony wzrost, ponieważ nie są w stanie wyekstrahować jonu metalu z kompleksu bez receptorów metalu.
Dodaj 10 mikrolitrów 10-krotnego wstępnego miksu i 90 mikrolitrów CDM do każdego z trzech dołków dla ślepej próby.
Gdy kultury w kolbie bocznej podwoją się
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych