Miękki test agarowy do wykrywania zabijania podsycaniego bakteriocyną u strzykawek Pseudomonas
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:17 min. • November 28th, 2025
Zacznij od stopionego, miękkiego agaru utrzymywanego w ciepłej temperaturze.
Zaszczep hodowlę Pseudomonas syringae , szczepu testowego, do agaru.
Następnie krótko przewij, aby równomiernie rozłożyć komórki.
Wlej mieszankę na zastygłą płytkę agarową i rozsmaruj równomiernie.
Zamknij pokrywkę i pozwól zastygnąć.
Na powierzchni stwardniałego agaru znalazł się przefiltrowany supernatant.
Supernatant zawiera bakteriocynę, cząsteczkę przeciwbakteryjną, pochodzącą ze szczepu P. syringae wywołanego stresem.
Inkubuj płytkę, aby umożliwić wzrost bakterii i dyfuzję bakteriocyny przez agar.
Bakteriocyna wiąże się z konkretnymi receptorami powierzchniowymi szczepu testowego i zakłóca jego błonę, prowadząc do śmierci komórki.
Skutkuje to powstaniem strefy przezroczystej na agarze, wskazującej obszar, w którym szczep testowy został zniszczony przez antybakteryjną cząsteczkę bakteriocynę.
Rozcieńcz kulturę 1 do 100 do świeżej KB. Inkubuj hodowlę przez trzy do czterech godzin, potrząsając w temperaturze pokojowej. Następnie przygotuj sterylny agar wodny, podkładając zawiesina agaru w ultraczystej wodzie.
Przed użyciem utrzymuj stopiony miękki agar w kąpieli wodnej o temperaturze 60 stopni Celsjusza. Za pomocą
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych