JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:24 min. • February 2nd, 2026
Zacznij od znieczulonej myszy z dwoma pełnogrubymi ranami wycinającymi na grzbiecie, z chirurgicznym usunięciem warstw naskórka i skóry.
Przezroczysty opatrunk foliowy zakrywa rany, izolując miejsce i zapobiegając skażeniu zewnętrznym.
Pozwól myszy na regenerację przez określony czas.
W tym czasie krew zawierająca różne składniki trafia do rany. Aktywuje to płytki krwi, uruchamiając tworzenie tymczasowej matrycy złożonej z fibryny, fibronektyny i proteoglikanów, a także inicjuje powstawanie zakrzepów.
Ponownie znieczulaj mysz i wstrzykuj sól fizjologiczną w boki, aby utrzymać nawodnienie.
Następnie wstrzyknij określoną dawkę luminescencyjnego szczepu Pseudomonas aeruginosa przez film do każdej rany.
Bakterie osiedlają się w matrycy tymczasowej, która wspiera ich przyczepność i wzrost.
Razem matryca i opatrunk filmowy tworzą sprzyjające warunki do powstawania biofilmu, co skutkuje miejscową przewlekłą infekcją.
Rejestruj luminescencję, aby monitorować infekcję bakteryjną.
24 godziny po operacji ponownie zważ ponownie znieczuloną mysz i podskórnie wstrzykni zwierzęciu 250 mikrolitrów podgrzanego, sterylnego chlorku sodu 0,9% w obu bokach.
Następnie załaduj 100 mikrolitrów świecącej zawiesiny szczepu P. aeruginosa do 500-litrowej strzykawki z gruźlicynową igłą 27 i wstrzyknij 40 mikrolitrów zawiesiny bakterii przez przezroczysty opatrunk do każdej rany.
Upewnij się, że zawiesina bakteryjna jest dobrze wymieszana, a przezroczysty opatrunek jest nienaruszony. Upewnij się, że przebijesz przezroczysty opatrunek tylko raz igłą, bokiem skosnym do góry.
Następnie odłóż mysz do klatki na poduszkę grzewczą z monitorowaniem i podaj wysokokaloryczne suplementy diety umieszczone między granulkami na dnie klatki.