JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:02 min. • February 2nd, 2026
Weź znieczuloną mysz z nacięciami skóry zakażonymi patogenną bakterią.
Bakteria ta została genetycznie zmodyfikowana tak, aby przenosić plazmid zawierający system raportowy luxABCDE , który umożliwia autonomiczną bioluminescencję.
Umieść mysz w pozycji leżącej na platformie do obrazowania bioluminescencji.
W miejscu zakażenia geny luksA i luxB bakterii kodują enzym lucyferazy, natomiast geny luxCDE kodują enzymy syntetyzujące długołańcuchowe aldehydy tłuszczowe, które stanowią podłoże dla lucyferazy.
W obecności tlenu lucyferaza katalizuje utlenianie swojego kofaktora, zredukowanego mononukleotydu flawinowego, który następnie reaguje z długołańcuchowym aldehydem tłuszczowym, wytwarzając światło niebiesko-zielone.
Ta bioluminescencja wskazuje na obecność bakterii aktywnych metabolicznie w miejscu zakażenia.
Za pomocą systemu obrazowania obrazuj miejsce zakażenia i ilościowo określ intensywność sygnału bioluminescencji.
W przypadku obrazowania in vivo zakażonych ran należy stosować protokoły zabezpieczenia biologicznego poziomu drugiego dla transportu myszy do i z aparatu obrazowego oraz umieścić znieczuloną mysz w pozycji leżącej w komorze obrazowej.
W oprogramowaniu obrazującym ustaw czas
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych