JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:46 min. • February 26th, 2026
Zacznij od supernatantu produkowanego przez ludzką mikrobiotę jelitową podczas fermentacji in vitro egzopolisacharydów. Supernatant zawiera deprotonowane krótkołańcuchowe kwasy tłuszczowe (SCFA) oraz inne metabolity.
Dodaj kwas metafosforowy, aby obniżyć pH supernatantu, i wir, aby dokładnie wymieszać. To przekształca SCFA w postaci protonowane, odpowiednie do analizy chromatografii gazowej.
Wiruj w wirówce, aby oddzielić zanieczyszczenia i zebrać supernatant zawierający SCFA i inne metabolity.
Przefiltruj supernatant, aby wyeliminować resztki zanieczyszczenia i uniknąć zakłóceń chromatografii.
W wysokowydajnym systemie chromatografii gazowej wstrzyknąć supernatant do podgrzanego wlotu, aby go odparować. Następnie wymieszaj parę z gazem obojętnym i przepuszczaj ją przez polarną kolumnę fazy stacjonarnej w celu separacji.
SCFA oddziałują ze stacjonarną fazą kolumny i rozdzielają się w zależności od lotności, przy czym kwasy o krótsych łańcuchach wydzielają się wcześniej niż dłuższe.
Zidentyfikuj stężenia różnych SCFA, porównując wyniki ze standardami wewnętrznymi. Odzwierciedla to degradację egzopolisacharydów przez mikroorganizmy w warunkach podobnych do jelit.
Aby zbadać wpływ EPS na pro
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych