Ocena roli odporności gospodarza w infekcji grzybiczej z wykorzystaniem modelu danio pręgowanego

Weź znieczulone dzikie danio dano i danio pręgowane immunosłabione, które nie mają limfocytów.

Umieść każdą rybę brzuszną stroną do góry w szczelinie wyrzeźbionej w wilgotnej gąbce, aby zachować żywotność.

Wstrzyknięcie Mycobacterium marinum do jamy brzusznej, aby ustalić infekcję ogólnoustrojową modelującą gruźlicę człowieka.

Po wstrzyknięciu przełóż ryby do wody ze słodkim akwarium w celu rekonwalescencji i monitoruj je.

U dzikich ryb odpowiedź zapalna tworzy ziarniniaka złożonego z bakterii, zakażonych makrofagów i limfocytów. Ziarniak zawiera bakterie, zapobiegając ich rozprzestrzenianiu się.

Limfocyty wydzielają cytokiny, które wzmacniają działanie makrofagów przeciwdrobnoustrojowe, umożliwiając zabijanie bakterii.

U ryb z obniżoną odpornością ziarniak nie posiada limfocytów. W rezultacie makrofagi pozostają częściowo aktywowane, co pozwala bakteriom przetrwać, rozmnażać się i rozprzestrzeniać się, co prowadzi do śmiertelności ryb.

Wygeneruj wykres przetrwania. Wysoka śmiertelność u ryb z obniżoną odpornością podkreśla rolę limfocytów w kontrolowaniu infekcji.

Najpierw pipetować 5-litrową kroplę rozcieńczonego roztworu bakteryjnego na kawałek folii parafinowej. Następnie wciągnij krop