Terapia światłem niebieskim w leczeniu lekoopornych infekcji bakteryjnych w ranach oparzonych w modelu myszy

Zacznij od znieczulonej myszy z odsłoniętym grzbietem, umieszczonej na pokrywce z szalki Petriego.

Mysz ma ranę oparzeniową zainfekowaną bioluminescencyjnymi, odpornymi na leki bakteriami.

Zakryj oczy myszy folią aluminiową, aby uniknąć nadmiernej ekspozycji na niebieskie światło.

Umieść mysz pod niebieskim urządzeniem LED w stałej odległości.

Napromieniuj ranę z stałą intensywnością. Zwiększ czas ekspozycji, aby podać wyższe dawki.

Światło przenika przez tkankę rany i dociera do bakterii kolonizujących.

W tych bakteriach światłoczułe cząsteczki pochłaniają niebieskie światło i ulegają fotoaktywacji, produkując reaktywne składniki tlenu (ROS).

ROS uszkadza składniki bakteryjne, w tym białka bioluminescencyjne, prowadząc do śmierci komórek bakteryjnych przy minimalnych szkodach dla otaczających tkanek.

Po każdej ekspozycji wykonaj obrazowanie bioluminescencyjne, aby monitorować żywotność bakterii wokół rany.

Wraz ze wzrostem dawki sygnał odpowiadająco maleje.

Ten spadek wskazuje na działanie antybakteryjne stresu oksydacyjnego wywołanego światłem niebieskim.

Po znieczuleniu myszy, zgodnie z protokołem tekstowym, losowo dzielą zwierzęta na grupę antybakteryjną z niebieskim światłem lub aBL oraz grupę kontrolną nieleczoną. W grupie poddawanej aBL użyj folii aluminiowej, aby zakryć oczy myszy, aby uniknąć nadmiernego naświetlenia światła. Umieść myszy oparzenia bezpośrednio pod diodą LED, a pod brzuchem myszy zakryj 35-milimetrową szalkę Petriego, aby utrzymać grzbiet w pozycji poziomej.

Następnie zamień miernik energii na mysz na kwadratowej szalce Petriego. Następnie przywróć wysokość myszy do pozycji, w której odległość między aperturą LED a powierzchnią przypalenia myszy jest równa odległości między aperturą LED a czujnikiem światła w mierniku energii. Napromieniuj zainfekowane oparzenia z napromieniowaniem 100 miliwatów na centymetr kwadratowy.

Dostarczaj aBL w alikwotach 72 dżuli na centymetr kwadrat, aż osiągniesz łączną dawkę 360 dżuli na centymetr kwadrat. Po każdej lekkiej dawce wykonaj bioluminescencyjne obrazowanie oparzeń myszy, jak pokazano wcześniej w tym filmie. W grupie kontrolnej nieleczonej wykonaj obrazowanie bioluminescencji oparzeń myszy w tych samych odstępach czasowych, co w grupie leczonej aBL.