JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:03 min. • March 31st, 2026
Zacznijmy od reaktora elektrochemicznego wyposażonego w zewnętrzną okładkę wodną, szczelnie uszczelnioną nad działającą elektrodą.
Następnie włóż elektrody referencyjne i przeciwniczkowe, aby zakończyć obwód elektryczny.
Usuń elektrodę referencyjną, dodaj podłoże odżywcze i odłóż elektrodę z powrotem.
Wprowadź filtrowany gaz azotowy, aby stworzyć warunki beztlenowe.
Umieść zestaw w klatce Faradaya, aby uniknąć zewnętrznych zakłóceń elektrycznych.
Podłącz system cyrkulacji wody, aby utrzymać temperaturę reaktora podczas przyłożenia napięcia.
Następnie podłącz się do potencjostatu i przyłoż stałe napięcie elektryczne do elektrody roboczej względem elektrody referencyjnej.
Wstrzyknij zawiesinę bakteryjną do reaktora i zamknij klatkę. Kontynuuj przystosowywanie napięcia elektrycznego.
Przyłożone napięcie stymuluje transfer elektronów zewnątrzkomórkowych z komórek bakteryjnych do elektrody roboczej, sprzyjając początkowemu przyczepieniu powierzchni.
Z czasem bakterie tworzą monowarstwowy biofilm na elektrodzie roboczym.
Aby zbudować reaktor elektrochemiczny z trzema elektrodami, umieść podłoże ITO jako elektrodę roboczą na dole reaktora.
Następnie włóż szklany cylinder i osłonę z politetrafluoretylenu oraz włoż platynowy drut jako kontraelektrodę. Następnie włóż elektrodę chlorku srebra do reaktora jako elektrodę referencyjną. Następnie do reaktora elektrochemicznego dodaj cztery mililitry DM uzupełnione o 10 milimolowych mleczanu oraz 0,5 grama ekstraktu drożdżowego na litr.
Po potwierdzeniu, że nie ma wycieku z reaktora elektrochemicznego, należy wprowadzić gaz azotowy do reaktora elektrochemicznego przez 20 minut, aby utrzymać warunki beztlenowe wewnątrz reaktora elektrochemicznego. Podłącz reaktor elektrochemiczny do potencjostatu i przyłoż dodatnie 0,4 V do elektrody ITO, utrzymując temperaturę reaktora elektrochemicznego na poziomie 30 stopni Celsjusza za pomocą zewnętrznego systemu cyrkulacji wody.
Dodaj 0,3 mililitra zawiesiny ogniwowej do reaktora elektrochemicznego przez port wtryskowy za pomocą strzykawki. OD600 w reaktorze zmienia się na 0,1. Kontynuuj zastosowanie potencjału przy dodatnim 0,4 V do elektrody ITO przez 25 godzin.