JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:17 min. • August 31st, 2026
Przygotuj kulturę bakterii lizogennej z nocnego hodowlania, w której większość komórek posiada uśpione DNA faga zintegrowane z ich genomem.
Zaszczepić w świeżym medium i inkubować.
Niektóre bakterie ulegają spontanicznej indukcji, wchodząc w cykl lityczny, podczas którego dochodzi do wycięcia i replikacji DNA faga oraz produkcji białek wirusowych.
Nowo zmontowane fagi infekcyjne są uwalniane poprzez lizę komórek.
Pobieraj próbki hodowli w określonych odstępach czasu.
Aby policzyć żywe, nieindukowane lizogeny, nanieś seryjne rozcieńczenia każdej próbki na płytkę agarową i inkubuj.
Policz kolonie, aby obliczyć liczba jednostek tworzących kolonie (CFU).
Aby policzyć infekcyjne fagi, nanieś te same rozcieńczenia na płytkę z agarem z antybiotykiem, uprzednio zaszczepioną opornymi na antybiotyki komórkami gospodarza wskaźnikowego. Ponieważ lizogeny są wrażliwe na antybiotyki, mogą rosnąć jedynie oporne komórki gospodarza.
Fagi infekują i lizują komórki, tworząc przejaśnienia.
Należy policzyć plamy, aby obliczyć jednostki tworzące plamy (PFU). Niższa liczba PFU wskazuje na mniejszą liczbę zdarzeń indukcji spontanicznej.
Przedstaw wykresy CFU i PFU w funkcji czasu. W wczesnej fazie wykładniczej wzro
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych