JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:42 min. • September 30th, 2026
Zacznij od ludzkich komórek nabłonkowych.
Pierwsza studzienka zawiera komórki niepoddane transfekcji, a druga studzienka zawiera komórki poddane transfekcji mimikiem microRNA.
W transfekowanych komórkach nić mimiku microRNA wiąże się z kompleksem białkowym, tworząc kompleks wyciszający indukowany przez RNA.
Usunąć medium i dodać zawiesinę wirusową.
Inkubować, aby umożliwić przywieranie wirusa.
Odssać pożywkę i dodać świeżą pożywkę, a następnie inkubować.
W komórkach nietransfekowanych wirus ulega endocytozie zależnej od receptorów i wnika do komórki.
Uwalnia ono genom wirusowy, który replikuje się i produkuje wiele cząsteczek wirusa.
W transfekowanych komórkach kompleks wyciszania indukowany przez RNA rozpoznaje genom wirusa, co wywołuje jego degradację i zmniejsza produkcję wirusa.
Uwalniane są nowe wirusy. Przenieś medium zawierające wirusy.
Odwiruj próbki, aby osadzić zanieczyszczenia, a następnie zbierz nadsączniki zawierające wirusa.
Dodaj supernatant do niezatransfekowanych komórek. Inkubuj w celu infekcji wirusowej.
Dołki potraktowane nadanadem z komórek nietransfekowanych wykazują wyższą śmiertelność komórek w porównaniu do dołków potraktowanych nadanadem z komórek transfekowanych mimi
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych