JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:44 min. • September 30th, 2026
Należy rozpocząć od wielodołkowej płytki zawierającej rozcieńczenia seryjne badanego związku w celu oceny aktywności przeciwwirusowej.
Do każdej studzienki dodaj zawiesinę komórek embrionalnej nerki człowieka zawierającą rekombinowany wirus odry wykazujący ekspresję lucyferazy.
Inkubować, aby umożliwić przyleganie komórek do dna każdego dołka.
W studzience kontrolnej bez związku testowego wirus łączy się z błoną komórkową i uwalnia swój genom do cytoplazmy.
Genom wirusa kieruje produkcją wirusowego RNA i białek, a także białka reporterowego lucyferazy.
W studzienkach testowych związek przeciwwirusowy hamuje replikację wirusa, zmniejszając produkcję lucyferazy.
Do każdej studzienki dodaj substrat specyficzny dla lucyferazy, który wchodzi w interakcję z lucyferazą i emituje luminescencję.
Użyj czytnika płytek do pomiaru natężenia luminescencji w każdej studzience.
Niższa luminescencja w studzienkach testowych w porównaniu ze studzienką kontrolną wskazuje na inhibicję wirusa.
Stopniowy spadek luminescencji wraz ze wzrostem stężenia związku wskazuje na zależną od dawki inhibicję replikacji wirusa.
Dodaj jeden mikrolitr z płytki z rozcieńczeniami związków do białej, kodowanej kreskowo płytki hodo
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych