JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:39 min. • September 30th, 2026
Zacznij od zawiesiny liposomów zawierających plazmid antygenomu rekombinowanego wirusa odry oraz plazmidy pomocnicze kodujące niezbędne białka wirusowe.
Plazmid antygenomu zawiera cDNA genomu wirusa odry, zmodyfikowane w celu ekspresji białek immunostymulujących oraz fluorescencyjnego białka reporterowego w zainfekowanych komórkach.
Przygotować hodowlę komórek produkcyjnych wirusa zawierającą antybiotyki w celu zapobiegania kontaminacji.
Wprowadź zawiesinę liposomów do hodowli i inkubuj.
liposomy łączą się z błoną komórkową, aby dostarczyć plazmidy.
Mechanizmy komórki gospodarza transkrybują cDNA antigenomu na RNA, a plazmidy pomocnicze na mRNA, co umożliwia ekspresję białek i tworzenie kompleksu replikacyjnego wirusa. Kompleks ten produkuje genomowe RNA, które umożliwia ekspresję białek wirusowych.
Genomowe RNA łączy się z białkami wirusowymi, tworząc rekombinowane cząstki wirusowe.
Zainfekowane komórki wykazują również ekspresję fluorescencyjnego białka reporterowego w celu wizualizacji mikroskopowej oraz produkują kodowane przez wirusa białko immunostymulujące.
Zainfekowane komórki tworzą wielojądrowe syncytia, co jest cechą charakterystyczną efektu cytopatycznego odry.
Należy wykorzyst
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych