JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:27 min. • September 30th, 2026
Rozpocznij od hodowli komórek nabłonkowych nerek utrzymywanych w medium zawierającym surowicę.
Zastąp to medium podłożem beznadserowym zawierającym genetycznie zmodyfikowane wirusy przenoszące geny immunomodulujące do zastosowań terapeutycznych.
Inkubuj komórki, aby umożliwić przyleganie wirusa do receptorów powierzchniowych komórek.
Usunąć nadsącz zawierający pozostały, nieprzyczepiony wirus.
Dodaj świeżą pożywkę z surowicą w celu utrzymania żywotności komórek i inkubuj.
Podczas inkubacji wirus wnika do komórki poprzez endocytozę zależną od receptora, uwalnia swój genom, a genom ten produkuje wirusowe RNA.
Genom wirusa ulega replikacji, podczas gdy wirusowe RNA produkuje nowe białka wirusowe.
Białka wirusowe łączą się w nowe cząsteczki wirusa, które są uwalniane do otaczającego medium.
Wirusy potomne wnikają do sąsiednich komórek, powodując infekcję i tworząc skupiska zainfekowanych komórek.
Ostrożnie zeskrob monowarstwę komórek, aby zebrać komórki produkujące terapeutyczne potomstwo wirusowe.
Przenieś zawiesinę do probówki i przechowuj w niskiej temperaturze do dalszej analizy.
W celu analizy kinetyki replikacji wirusa odry na jeden dzień przed zakażeniem wysiać 100 000 komórek Vero w 1 ml
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych