Donosowa infekcja myszy wirusem herpes myszy w celu oceny odpowiedzi immunologicznej gospodarza

Zacznij od zdrowej, znieczulonej myszy ustawionej do podania drogą oddechową.

Podaj mysi herpeswirus drogą donosową w celu zainicjowania infekcji.

Wirus przemieszcza się przez drogi oddechowe i dociera do płuc.

W płucach wirus infekuje komórki nabłonka płuc i uwalnia swój nukleokapsyd.

Genom wirusa wnika do jądra komórkowego, gdzie zostaje przepisany na wirusowe RNA.

Cytosolowy sensor gospodarza rozpoznaje wirusowe RNA i inicjuje szlaki sygnalizacyjne, które aktywują specyficzne czynniki transkrypcyjne. Czynniki te promują następnie ekspresję genów cytokin, co prowadzi do produkcji cytokin przeciwwirusowych.

Po zakażeniu uśmierconą mysz należy poddać sekcji i pobrać tkankę płucną.

Umieść jeden płat płuca w probówce zawierającej kulki krzemionkowe i dodaj zimną pożywkę hodowlaną.

Zhomogenizuj tkankę, aby rozbić komórki i uwolnić komponenty wewnątrzkomórkowe, w tym cytokiny przeciwwirusowe.

Schłodź homogenat na lodzie, a następnie powtórz homogenizację, aby zapewnić całkowite rozbicie tkanki.

Odwiruj próbki, aby osadzić resztki komórkowe.

Zabierz nadsącz zawierający cytokiny przeciwwirusowe, aby ocenić odpowiedź immunologiczną gospodarza na zakażenie herpeswirusem.

Zaszczepcie donosowo znieczulo