JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 4:05 min. • September 30th, 2026
Wewnątrz komory biocontainment należy pobrać wysoce zaraźliwą zawiesinę wirusa do kapsułki zawierającej siatki TEM.
Inkubować w pozycji poziomej, aby wspomóc równomierne przyleganie wirusów do siatki.
Usunąć zawiesinę z nie związanymi wirusami, a następnie dodać utrwalacz w celu sieciowania białek, co pozwala zachować strukturę wirusa i zmniejsza zakaźność.
Po inkubacji przeprowadzić płukanie w celu usunięcia pozostałości utrwalacza.
Dodaj elektronowo gęsty barwnik negatywny, który wiąże się z siatkami wokół wirusa i zwiększa kontrast podczas obrazowania.
Zdejmij pipetę i osusz siatki, aby usunąć nadmiar barwnika.
Umieść kapsułkę w probówce do wirowania z papierem filtracyjnym nasączonym czterotlenkiem osmu, następnie szczelnie zamknij probówkę i inkubuj w celu utrwalenia oparami.
Tetroksyd osmu stabilizuje strukturę błony lipidowej, poprawia kontrast obrazowania i całkowicie inaktywuje wirusa, co umożliwia bezpieczny transport poza obszar biocontainment.
W pracowni TEM należy wypłukać siatki, pozostawić je do wyschnięcia na powietrzu, a następnie przechowywać do czasu wykonania obrazowania.
Ta metoda zapewnia bezpieczniejszą obsługę próbek wirusowych i ułatwia przygotowanie preparatów.
Na p
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych