JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:24 min. • September 30th, 2026
Zacznij od zastosowania siatki do transmisyjnego mikroskopu elektronowego (TEM) powleczonej węglem, umieszczonej na szkiełku przedmiotowym.
Umieść szkiełko w komorze i zastosuj wyładowanie żarowe, aby uczynić powierzchnię węglową hydrofilową, co zapewni jednorodne rozprzestrzenienie próbki.
Wyjmij szkiełko, przytrzymaj siatkę pęsetą i nanieś na nią zawiesinę nanocząsteczek wirusa zapalenia wątroby typu E (HEV).
Nanocząsteczki te składają się z rekombinowanych białek kapsydu HEV i nie zawierają kwasów nukleinowych ani akcesoryjnych białek wirusowych.
Inkubuj, aby umożliwić adsorpcję nanocząstek na powierzchni siatki. Następnie osusz za pomocą papieru filtracyjnego, aby usunąć nadmiar zawiesiny.
Przemyj siatkę wodą dejonizowaną, aby usunąć niezaadsorbowane nanocząstki, a następnie ponownie osusz ją papierem filtracyjnym.
Dodać barwnik octan uranylu i krótko inkubować.
Octan uranylu tworzy gęste elektronowo tło wokół nanocząsteczek, co zwiększa kontrast podczas obrazowania TEM.
Odsącz nadmiar barwnika i umieść siatkę w komorze osuszającej w celu wysuszenia.
W TEM nanocząsteczki HEV widoczne są jako jednorodne, puste struktury ikosaedryczne, pozbawione wirusowych kwasów nukleinowych.
Rozcień pró
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych