Pobieranie próbek z pojedynczych komórek za pomocą mikromanipulacji: technika izolowania pojedynczych komórek z zawiesiny komórek rakowych

Pobieranie próbek z pojedynczych komórek umożliwia wyizolowanie pojedynczej żywej komórki z zawiesiny komórek nowotworowych w celu dalszej analizy.

Rozpocznij izolację od zawiesiny komórek rakowych. Przenieść żądaną objętość tej zawiesiny na szkiełko podstawowe. Pozostaw szkiełko na chwilę w spokoju, aby zmniejszyć ruch cząstek i pozwolić komórkom się uspokoić.

Teraz przenieś szkiełko pod mikroskop wyposażony w mikromanipulator połączony z końcówką mikrokapilarną. Ten wysoce precyzyjny instrument ułatwia fizyczną interakcję z komórkami w próbce na poziomie mikroskopowym.

Skieruj końcówkę mikrokapilary blisko pojedynczej komórki docelowej. Stosując odsysanie, zbierz komórkę docelową do mikrokapilary. Teraz przenieś mikrokapilę bezpośrednio do probówki zawierającej żądany bufor zbiorczy.

Wysuń zawartość mikrokapilar, aby uwolnić wychwyconą pojedynczą komórkę do buforu. Izolowaną żywą komórkę należy przechowywać na lodzie do czasu dalszej analizy.

W celu mikromanipulacji przenieś całe 100 mikrolitrów zawiesiny komórek na szklane szkiełko. Następnie umieść szklane szkiełko na mikroskopie wyposażonym w mikromanipulator i pozwól komórkom osiąść przez 5 minut. Następnie w 0,2-mililitrowyc