$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Pobieranie próbek z pojedynczych komórek umożliwia wyizolowanie pojedynczej żywej komórki z zawiesiny komórek nowotworowych w celu dalszej analizy.
Rozpocznij izolację od zawiesiny komórek rakowych. Przenieść żądaną objętość tej zawiesiny na szkiełko podstawowe. Pozostaw szkiełko na chwilę w spokoju, aby zmniejszyć ruch cząstek i pozwolić komórkom się uspokoić.
Teraz przenieś szkiełko pod mikroskop wyposażony w mikromanipulator połączony z końcówką mikrokapilarną. Ten wysoce precyzyjny instrument ułatwia fizyczną interakcję z komórkami w próbce na poziomie mikroskopowym.
Skieruj końcówkę mikrokapilary blisko pojedynczej komórki docelowej. Stosując odsysanie, zbierz komórkę docelową do mikrokapilary. Teraz przenieś mikrokapilę bezpośrednio do probówki zawierającej żądany bufor zbiorczy.
Wysuń zawartość mikrokapilar, aby uwolnić wychwyconą pojedynczą komórkę do buforu. Izolowaną żywą komórkę należy przechowywać na lodzie do czasu dalszej analizy.
W celu mikromanipulacji przenieś całe 100 mikrolitrów zawiesiny komórek na szklane szkiełko. Następnie umieść szklane szkiełko na mikroskopie wyposażonym w mikromanipulator i pozwól komórkom osiąść przez 5 minut. Następnie w 0,2-mililitrowych probówkach do PCR odpipetować 2 mikrolitry głównej mieszanki do lizy komórek i przenieść na lód. Użyj mikromanipulatora, aby zebrać pojedynczą komórkę w 1 mikrolitrze soli fizjologicznej buforowanej fosforanem 1X.
Następnie przenieś komórkę bezpośrednio do 2 mikrolitrów głównej mieszanki do lizy komórek. Użyj mikrofugi na biurku, aby szybko odwirować próbki o wymiarach 2000 x g przez 3 sekundy, aby zebrać płyn na dnie probówki.