JoVE Encyclopedia of Experiments
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 3:40 min • April 30th, 2023
Na początek przygotuj uśpioną mysz w pozycji leżącej. Zaciśnij jedną z jego stóp, aby wyprostować kończynę w pionie. Delikatnie chwyć skórę kończyny dolnej.
Następnie chirurgicznie usuń skórę i powięź, warstwę luźnej tkanki łącznej tuż pod skórą, odsłaniając leżące poniżej mięśnie brzucha kończyny dolnej.
Zidentyfikuj mięsień brzuchaty łydki - duży, powierzchowny mięsień dwugłowy - na tylnej kończynie dolnej. Pochodzi z kłykci bocznych i przyśrodkowych tylnej części kości udowej i przyczepia się do kości piętowej - poprzez ścięgno piętowe.
Przytrzymaj dystalny koniec mięśnia i pociągnij brzuch mięśnia w kierunku jego początku. Wytnij ścięgno piętowe łydki, a następnie mięsień w miejscu początkowym najbliżej kości udowej.
Teraz zlokalizuj mięsień piszczelowy przedni. Mięsień pochodzi z przednio-bocznej powierzchni kości piszczelowej i przyczepia się do przyśrodkowej kości klinowej poprzez dystalne ścięgno.
Odłącz brzuch mięśnia piszczelowego od leżącej poniżej tkanki łącznej. Przetnij dystalne ścięgno i mięsień w początku najbliżej kości piszczelowej.
Na koniec przenieś wycięte mięśnie do krioprobówek. Przechowuj probówki w niskich temperaturach do czasu dalszej analizy.
Aby uniknąć zanieczyszczenia sierści, spryskaj całe ciało 70% etanolem. Następnie umieść zwierzę na łóżku sekcyjnym w pozycji leżącej na plecach i przymocuj jedną tylną kończynę do podwyższonego zacisku biurety, aby wyprostować kończynę w pionie. Za pomocą kleszczy Dumonta chwyć powierzchowną skórę tylnej kończyny i użyj zakrzywionych cienkich nożyczek, aby delikatnie usunąć skórę i powięź, odsłaniając leżące pod spodem mięśnie brzucha kończyny dolnej.
Zidentyfikuj mięsień brzuchaty łydki na tylnej kończynie dolnej na podstawie jego pochodzenia w kłykciach bocznych i przyśrodkowych na tylnej kości udowej oraz jego przyczepu do kości piętowej przez ścięgno piętowe. Użyj kleszczy, aby chwycić dystalny koniec mięśnia brzuchatego łydki i pociągnij brzuch mięśnia w kierunku jego początku. Następnie użyj nożyczek, aby przeciąć mięsień u źródła jak najbliżej kości udowej i przenieś mięsień do wstępnie zważonego naczynia.
Natychmiast zważ naczynie i przenieś mięsień do wstępnie oznakowanej krioprobówki. Następnie zidentyfikuj mięsień piszczelowy przedni od jego początku na przednio-bocznej powierzchni kości piszczelowej i jego przyczepu do przyśrodkowego pisma klinowego przez dystalne ścięgno. Następnie chwyć stopę za palce palcem wskazującym i kciukiem i włóż końcówkę kleszczy Dumonta bezpośrednio pod powierzchowne dystalne ścięgno kości piszczelowej.
Przesuń kleszcze tak, aby stroną można było użyć do odłączenia brzucha mięśnia piszczelowego od leżącej poniżej tkanki łącznej i użyj cienkich zakrzywionych nożyczek do przecięcia dystalnego ścięgna. Następnie przetnij mięsień na początku jak najbliżej kości piszczelowej.
Niniejszy artykuł opisuje procedurę chirurgiczną izolacji mięśnia brzuchatego łydki oraz mięśnia piszczelowego przedniego od eutanazowanej myszy. Metoda obejmuje szczegółowe kroki identyfikacji, wycięcia i utrwalenia mięśni do dalszych analiz.
Precyzyjna izolacja tkanki mięśni szkieletowych umożliwia wiarygodną późniejszą analizę biochemiczną i histologiczną w badaniach przedklinicznych. Procedura ta wspiera walidację celu, dostarczając próbki tkanek o wysokiej integralności do mechanistycznej oceny ryzyka w odniesieniu do szlaków związanych z mięśniami. Powtarzalne techniki wycięcia poprawiają przygotowanie do analizy oraz spójność danych w ramach procesów badawczych.
Metoda ta wpisuje się w proces odkrywania leków – od identyfikacji celu po walidację przedkliniczną – umożliwiając niezawodne pozyskiwanie tkanek do testów funkcjonalnych.
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Ostatnia aktualizacja: 22 sierpnia 2026