JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 3:02 min. • April 30th, 2023
Aby opróżnić i umyć pęcherz moczowy myszy, zacznij od znieczulenia samicy myszy w pozycji leżącej. Następnie zaopatrz się w cewnik o odpowiedniej wielkości. Nasmaruj końcówkę cewnika, aby zmniejszyć tarcie i zapewnić płynne wprowadzenie cewki moczowej. Następnie powoli i delikatnie wprowadź nasmarowany cewnik, przepuszczając go przez otwór cewki moczowej, do pęcherza.
Po pomyślnym cewnikowaniu mocz zaczyna spływać z pęcherza do cewnika. Teraz opróżnij cewnik wypełniony moczem. Za pomocą pipety dodaj odpowiednią buforowaną sól fizjologiczną do zewnętrznego końca cewnika, podczas gdy jego przeciwny koniec znajduje się w pęcherzu. Do zewnętrznego końca cewnika przymocuj strzykawkę. Delikatnie popchnąć strzykawkę, aby dostarczyć sól fizjologiczną do pęcherza.
Teraz wyjmij strzykawkę. Pozwól, aby sól fizjologiczna wraz z resztkowym moczem spłynęła z pęcherza przez cewnik. Następnie należy usunąć z cewnika resztki moczu zmieszanego z solą fizjologiczną. Powtórz płukanie pęcherza solą fizjologiczną dwukrotnie, aby zapewnić całkowite usunięcie moczu z pęcherza. Przygotowana mysz jest wreszcie gotowa do dalszych procedur eksperymentalnych.
Aby rozpocząć tę procedurę, należy autoklawować wszystkie narzędzia chirurgiczne i wysterylizować miejsce pracy 70% etanolem. Podczas wykonywania kolejnych zabiegów należy często spryskiwać narzędzia chirurgiczne i rękawice 70% etanolem, aby utrzymać sterylne warunki.
Na początek znieczul mysz i ogol obszar operacyjny. Aby usunąć mocz, nałóż lubrykant na cewnik i upewnij się, że jego zewnętrzna powierzchnia jest całkowicie pokryta. Następnie włóż cewnik do ujścia cewki moczowej myszy i powoli dociśnij go, aż dotrze do pęcherza. Delikatnie uciskaj brzuch, aby pomóc w odprowadzaniu moczu.
Następnie wyrzuć mocz za pomocą pipety do zlewki na odpady. Następnie należy odpipetować 80 mikrolitrów PBS do zewnętrznego końca cewnika, tak aby drugi koniec nadal znajdował się w pęcherzu. Następnie ostrożnie przymocuj 1-mililitrową strzykawkę do cewnika. Delikatnie wepchnąć strzykawkę, aby wstrzyknąć PBS do pęcherza.
Pozostaw trochę PBS w cewniku, aby uniknąć tworzenia się pęcherzyków powietrza w pęcherzu. Następnie należy wyjąć strzykawkę i poczekać, aż PBS spłynie z pęcherza. Delikatnie naciśnij brzuch, aby ewakuować PBS. Następnie wyrzucić PBS z cewnika za pomocą pipety do zlewki na odpady. Powtórz mycie PBS jeszcze dwa razy.