JoVE Encyclopedia of Experiments
Biologia
0 wyświetleń • 3:03 min • July 8th, 2025
Świnie mają wielopłatkowe płuca - sparowany narząd oddychania - otaczający serce w jamie klatki piersiowej. Tchawica umożliwia przepływ powietrza do i z płuc. Rozgałęzia się na dwie główne drogi oddechowe lub oskrzela, prowadzące do płuc.
W płucach oskrzela dzielą się na coraz mniejsze drogi oddechowe, a najmniejsze końcowe gałęzie dróg oddechowych nazywane są oskrzelikami. Oskrzeliki prowadzą do maleńkich pęcherzyków powietrznych w kształcie balonów zwanych pęcherzykami płucnymi, które są miejscami wymiany gazowej w płucach.
Aby wyizolować skrawki tkanki oskrzelików, zacznij od umieszczenia świeżo zebranych płuc świń na sterylnej platformie. Ciepło sterylizuje brzuszną powierzchnię opłucnej - cienką błoniastą strukturę wyściełającą płuca - w celu wyeliminowania zanieczyszczeń powierzchniowych z tkanki. Ten krok ułatwia również łatwe nacięcie opłucnej w kolejnych krokach.
Naciąć wzdłuż płuca i wyciąć otaczającą tkankę, aby odsłonić chrząstkę oskrzela. Ponadto wykonaj poprzeczne nacięcie w najwyższym punkcie oskrzela, aby odłączyć je od tchawicy.
Trzymając wolny koniec oskrzela, delikatnie oddziel długość oskrzela z oskrzelikami od otaczającej tkanki pęcherzykowej. Wycięty odcinek oskrzelika przepłukać odpowiednim podłożem. Wycinek tkanki oskrzelikowej jest gotowy do dalszych eksperymentów.
Płuca należy pobrać natychmiast po uboju i przetransportować do laboratorium w domowej chłodziarce. Pracuj na wysterylizowanej powierzchni i pod płomieniem. Umieść płuca na czystej plastikowej desce do krojenia pokrytej autoklawowaną folią aluminiową i sprawdź, czy oskrzeliki pozostają nienaruszone. Płuca nie nadają się do użytku, jeśli doszło do uszkodzenia w rzeźni lub podczas transportu.
Podgrzej szpachlówkę pod płomieniem i bardzo krótko dotknij nożem obszaru płuca otaczającego oskrzelik, aby wysterylizować powierzchnię tkanki. Odetnij tkankę powierzchniową otaczającą oskrzelik za pomocą sterylnie zamontowanej żyletki, wykonując nacięcia równoległe do oskrzelika, aby zapobiec uszkodzeniom.
Po odsłonięciu oskrzelików wykonaj nacięcie przekrojowe przez oskrzelik w najwyższym widocznym punkcie. Używając sterylnych kleszczy, lekko przytrzymaj wolny koniec oskrzelika i odetnij pozostałą niechcianą tkankę za pomocą sterylnie zamontowanej żyletki. Wykonaj ostatnie nacięcie w przekroju poprzecznym w poprzek oskrzelików, zanim widoczne będą jakiekolwiek rozgałęzienia, aby usunąć oskrzeliki z płuc.
Niniejszy artykuł szczegółowo opisuje strukturę anatomiczną płuc świń oraz przedstawia protokół izolacji przekrojów tkanki oskrzelikowej. Zastosowana metodologia zapewnia nienaruszoną strukturę tkanki do dalszych doświadczeń.
Niezawodna ekstrakcja nienaruszonej tkanki oskrzelikowej z płuc świń umożliwia opracowanie fizjologicznie istotnych modeli infekcji ex vivo do poszukiwania leków na choroby układu oddechowego. Możliwość ta wspiera wczesną walidację celów terapeutycznych oraz ograniczanie ryzyka mechanistycznego w badaniach nad przewlekłymi infekcjami płuc, szczególnie w przypadku patogenów takich jak Pseudomonas aeruginosa i Staphylococcus aureus. Standaryzowane przygotowanie tkanki zwiększa pewność predykcyjną i ciągłość translacyjną w ramach przedklinicznych etapów badawczych.
Niniejszy protokół ekstrakcji tkanek znajduje zastosowanie na etapie przejściowym między wczesnymi odkryciami a rozwojem modeli przedklinicznych, umożliwiając tworzenie wiarygodnych modeli zakażeń do późniejszego screeningu oraz badań translacyjnych.
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Ostatnia aktualizacja: 22 sierpnia 2026