Dokanałowe umieszczenie drenu lędźwiowego: technika pobierania płynu mózgowo-rdzeniowego z odcinka lędźwiowego kręgosłupa w modelu wieprzowym
JoVE Encyclopedia of Experiments
Biologia
0 wyświetleń • 3:02 min • July 8th, 2025
Nakłucie lędźwiowe wykonuje się poprzez wstrzyknięcie specjalistycznej igły w przestrzeń śródoponową kręgosłupa w dolnej części pleców w celu pobrania próbki płynu mózgowo-rdzeniowego lub płynu mózgowo-rdzeniowego. Na początek umieść znieczuloną świnię w prawej pozycji bocznej na platformie chirurgicznej. Upewnij się, że kręgosłup jest zgięty, co zwiększa odstępy między kręgami.
Weź zestaw igły składający się z igły wkładanej umieszczonej wewnątrz igły wprowadzającej. Zlokalizuj przestrzeń między czwartym a piątym kręgiem lędźwiowym. Przebić igłę przez warstwy skóry i głębsze tkanki.
Wyjąć igłę z wkładki i podłączyć strzykawkę wypełnioną solą fizjologiczną do igły wprowadzającej. Wbić igłę do środka, jednocześnie wstrzykując sól fizjologiczną do kręgosłupa. Ten krok ułatwia łatwe przejście igły do przestrzeni zewnątrzoponowej znajdującej się wokół rdzenia kręgowego.
Zastrzykać strzykawkę na igłę wkładaną. Przesuń igłę, aby nakłuć oponę twardą - warstwę tkanki pokrywającą rdzeń kręgowy. Wyjąć igłę do wkładki i wprowadzić rurkę drenującą lędźwiową do przestrzeni dooponowej.
Odessać niewielką ilość próbki płynu mózgowo-rdzeniowego, aby potwierdzić prawidłowe ułożenie rurki i wyjąć igłę. Zszyj rurkę odpływową w jej pozycji i podłącz ją do systemu drenażowego płynu mózgowo-rdzeniowego, jednocześnie monitorując jej ciśnienie.
W celu przezskórnego umieszczenia drenażu płynu mózgowo-rdzeniowego w celu pomiaru i kontroli ciśnienia mózgowo-rdzeniowego, określ poziom odcinka lędźwiowego 4/5 lub L 5/6. Nakłuć skórę i przestrzeń podskórną igłą wprowadzającą, a następnie usunąć igłę do wkładu. Umieść strzykawkę wypełnioną solą fizjologiczną na igłę wprowadzającą i przy stałym nacisku ostrożnie wprowadź igłę do przestrzeni zewnątrzoponowej.
Gdy wyczujesz utratę odporności, wskazującą na prawidłowe umiejscowienie znieczulenia zewnątrzoponowego, włóż igłę do wkładu i wsuń igłę o 2 do 3 milimetrów w przestrzeń dooponową. Wprowadź drenaż na głębokość do 20 centymetrów. Podłącz adapter Luer-lock i sprawdź pozycję, ostrożnie zasysając płyn. Następnie ostrożnie przymocuj drenaż za pomocą szwów i podłącz drenaż do systemu drenażu płynu mózgowo-rdzeniowego.
Przegląd
Niniejszy artykuł opisuje procedurę wykonywania punkcji lędźwiowej w celu pobrania próbek płynu mózgowo-rdzeniowego (PMR). Technika ta polega na precyzyjnym wprowadzeniu igły do kanału kręgowego, aby umożliwić odessanie PMR do celów diagnostycznych.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Neuronauka
- Procedury kliniczne
- Dynamika płynów
Wprowadzenie
- Płyn mózgowo-rdzeniowy ma kluczowe znaczenie w diagnozowaniu schorzeń neurologicznych.
- Punkcja lędźwiowa jest powszechną procedurą stosowaną w warunkach klinicznych.
- Właściwa technika jest niezbędna, aby zminimalizować ryzyko wystąpienia powikłań.
- Zrozumienie anatomii jest kluczowe dla prawidłowego umieszczenia igły.
Cel badania
- W celu zademonstrowania techniki nakłucia lędźwiowego w kontrolowanym środowisku.
- W celu zapewnienia dokładnego pobrania próbek CSF do analizy diagnostycznej.
- W celu podkreślenia znaczenia monitorowania podczas procedury.
Zastosowane metody
- Ułożenie badanego w pozycji bocznej prawej.
- Identyfikacja kręgów lędźwiowych w celu wprowadzenia igły.
- Użycie strzykawki wypełnionej solą fizjologiczną w celu ułatwienia posuwaniu igły.
- Wprowadzenie drenu lędźwiowego do pobrania CSF.
Główne wyniki
- Pomyślne pobranie próbek CSF potwierdzone za pomocą aspiracji.
- Wykazano prawidłowe umiejscowienie drenu lędźwiowego.
- Monitorowanie ciśnienia CSF określono jako kluczowy etap.
- Technika została zwalidowana do zastosowań klinicznych w warunkach badawczych.
Wnioski
- Procedura punkcji lędźwiowej jest skuteczną metodą pobierania próbek CSF.
- Właściwa technika zmniejsza ryzyko wystąpienia powikłań.
- Szkolenie z tej procedury jest niezbędne dla badaczy klinicznych.
Najczęściej zadawane pytania
Znaczenie dla przemysłu
Technika ta umożliwia kontrolowany drenaż płynu mózgowo-rdzeniowego (PMR) oraz monitorowanie ciśnienia w modelu świni, co wspiera przedkliniczną ocenę strategii neuroprotekcyjnych w niedokrwieniu i reperfuzji rdzenia kręgowego. Dzięki ustanowieniu powtarzalnego systemu drenażu PMR badacze mogą ocenić parametry hemodynamiczne i metaboliczne, które są kluczowe dla walidacji celów w opracowywaniu leków ukierunkowanych na OUN. Metoda ta zapewnia system istotny z punktu widzenia choroby, służący do mechanistycznego ograniczania ryzyka w przypadku kandydatów na leki przed przejściem do większych modeli zwierzęcych lub wczesnych prób klinicznych.
Strategiczne zastosowania w badaniach i rozwoju biofarmaceutycznym
Wstępne odkrycia i walidacja celu
- Wartość naukowa: Umożliwia badanie biomarkerów płynu mózgowo-rdzeniowego oraz dynamiki ciśnienia w celu walidacji celów uczestniczących w szlakach odpowiedzi na uraz rdzenia kręgowego.
- Wartość operacyjna: Zapewnia zestandaryzowane podejście do pobierania próbek płynu mózgowo-rdzeniowego i kontroli ciśnienia, co pozwala na uzyskanie spójnych wyników eksperymentalnych.
Przesiewy i opracowanie testów
- Wartość naukowa: Pozwala na uzyskanie mierzalnej ilości płynu mózgowo-rdzeniowego (CSF) na potrzeby opracowywania testów biomarkerów oraz monitorowania odpowiedzi farmakologicznej.
- Wartość operacyjna: Wspiera standaryzację testów poprzez kontrolowany drenaż CSF i utrzymanie ciśnienia.
Badania translacyjne i przedkliniczne
- Wartość naukowa: Oferuje model świński o istotności anatomicznej i fizjologicznej w odniesieniu do fizjologii ludzkiego płynu mózgowo-rdzeniowego (CSF), co zwiększa przewidywalność translacyjną.
- Wartość operacyjna: Umożliwia podłużne monitorowanie parametrów CSF w celu wsparcia decyzji go/no-go w procesach przedklinicznych.
Integracja potoku i przepływu pracy
Metoda ta wpisuje się w kontinuum od etapu odkrycia do badań przedklinicznych, umożliwiając analizę biomarkerów w płynie mózgowo-rdzeniowym oraz modulację ciśnienia podczas badań nad niedokrwieniem i reperfuzją, co wspiera wczesną weryfikację zaangażowania celu i walidację funkcjonalną.
- Biologia odkrywcza: Wspomaga testowanie hipotez dotyczących neurozapalnych i niedokrwiennych szlaków zależnych od płynu mózgowo-rdzeniowego w modelach urazów rdzenia kręgowego.
- Przesiewy: Umożliwia przygotowanie próbek płynu mózgowo-rdzeniowego do dalszych analiz analitycznych w celu oceny wpływu związków na uwalnianie biomarkerów.
- Analityka: Dostarcza ilościowe pomiary ciśnienia i objętości płynu mózgowo-rdzeniowego, które pomagają porównać warunki leczenia i ocenić skuteczność farmakologiczną.
- Badania translacyjne: Łączy dynamikę płynu mózgowo-rdzeniowego w modelach świńskich z ludzką patofizjologią, wspierając dopasowanie biomarkerów i postępy w badaniach z uwzględnieniem ryzyka.
- Ponowne wykorzystanie w przedsiębiorstwie: Tworzy platformę dostępu i monitorowania płynu mózgowo-rdzeniowego, którą można ponownie wykorzystać w wielu badaniach nad opieką neurokrytyczną i urazami OUN.
Wpływ operacyjny i instytucjonalny
- Wartość naukowa: Zwiększa pewność predykcyjną poprzez umożliwienie bezpośredniego pomiaru biomarkerów i ciśnienia w CSF jako funkcjonalnych odczytów modulacji celu.
- Wartość operacyjna: Poprawia powtarzalność i standaryzację procedur pobierania i drenażu CSF w obrębie kohort eksperymentalnych.
- Wartość strategiczna: Redukuje niepewność biologiczną w rozwoju leków na OUN, dostarczając wczesnych danych hemodynamicznych i metabolicznych z klinicznie istotnego przedziału.
- Wpływ na portfolio: Umożliwia dostosowanie priorytetyzacji kandydatów neuroprotekcyjnych do ryzyka w oparciu o profile odpowiedzi ciśnienia i biomarkerów CSF.
Uwagi dotyczące wdrożenia
- Wymaga doświadczenia w zakresie technik chirurgicznych u dużych zwierząt oraz neuroanatomii w celu dokładnego wykonania punkcji lędźwiowej i umieszczenia drenażu.
- Sukces procedury zależy od sterylnego instrumentarium chirurgicznego, systemów monitorowania ciśnienia oraz zestawów do pobierania płynu mózgowo-rdzeniowego.
- Konieczna jest standaryzacja współpracy między zespołem chirurgicznym, zespołem monitorującym perfuzję a zespołami analitycznymi w celu zapewnienia spójności danych.
- Wymaga uwzględnienia modyfikacji przy adaptacji techniki do różnych szczepów świń lub modeli urazów.
- Ograniczona koniecznością stosowania techniki aseptycznej i uważnej regulacji ciśnienia płynu mózgowo-rdzeniowego, aby uniknąć powikłań, takich jak nadmierny drenaż lub infekcja.
Najczęściej zadawane pytania dotyczące biofarmacji
Izolacja płynu mózgowo-rdzeniowego z zarodków gryzoni do stosowania z wypreparowanymi eksplantatami kory mózgowej
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Ulepszona metoda pobierania płynu mózgowo-rdzeniowego od znieczulonych myszy
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Bezpośrednia implantacja kaniuli w Cisterna magna świń
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Technika chirurgiczna podawania terapii do rdzenia kręgowego: demonstracja procedury u miniprosiaków rasy Gottingen
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Laserowe wprowadzanie sondy dopplerowskiej: technika ilościowego oznaczania przepływu krwi w rdzeniu kręgowym w czasie rzeczywistym w modelu świni
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Dokanałowe podawanie badanego związku do ośrodkowego układu nerwowego szczura
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Metoda anestezjologii, chirurgii i pobierania do oceny transpedikularnych przy użyciu modelu kręgosłupa lędźwiowego u świń in vivo
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Laminotomia w celu uzyskania dostępu do ganglionu korzenia grzbietowego lędźwiowego i wstrzyknięcia u świń
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Dokanałowe dostarczanie oligonukleotydów antysensownych w ośrodkowym układzie nerwowym szczura
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Ocena mikroperfuzji rdzenia kręgowego w czasie rzeczywistym w świńskim modelu niedokrwienia/reperfuzji
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Ostatnia aktualizacja: 29 sierpnia 2026