JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 4:16 min. • July 8th, 2025
W układzie nerwowym interakcje międzykomórkowe - interakcje między specyficznymi cząsteczkami adhezyjnymi komórek synaptycznych, białkami transbłonowymi, na neuronach presynaptycznych i postsynaptycznych - tworzą kompleks w synapsach, pośrednicząc w sygnalizacji transsynaptycznej.
Aby wykryć interakcje międzykomórkowe między cząsteczkami adhezji komórek synaptycznych wyrażonymi na ludzkich embrionalnych komórkach nerki za pomocą testu agregacji komórek, należy rozpocząć od transfekowanych zawiesin komórek.
Jedna transfekowana populacja komórek wyraża pożądaną cząsteczkę adhezyjną komórek presynaptycznych i białko zielonej fluorescencji; druga wyraża specyficzną cząsteczkę adhezyjną komórek postsynaptycznych i białko czerwonej fluorescencji. Uzyskuje się również dwie populacje komórek wykazujące ekspresję białek zielonej i czerwonej fluorescencji.
Odwirować komórki. Ponownie zawiesić komórki w odpowiednich pożywkach uzupełnionych jonami wapnia. Wymieszaj równo transfekowane komórki obu populacji w probówce. Powtórz te czynności dla pozostałych populacji komórek.
Podczas inkubacji jony wapnia wiążą się z określonym miejscem na białku presynaptycznym ulegającym ekspresji w populacji k
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych