JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:08 min. • July 8th, 2025
Komórki tuczne — wyspecjalizowane białe krwinki, zawierają ziarnistości wydzielnicze bogate w enzymy lizosomalne, takie jak beta-heksozaminidaza.
Aby przeprowadzić degranulację komórek tucznych — proces polegający na uwalnianiu granulek wydzielniczych, należy rozpocząć od płytki wielodołkowej zawierającej zawiesinę mysich komórek tucznych otrzewnej wstępnie potraktowaną immunoglobulinami.
Potraktuj komórki docelową substancją chemiczną. Docelowa substancja chemiczna o potencjale stymulującym oddziałuje z wstępnie związanymi immunoglobulinami na specyficzne receptory komórek tucznych. Aktywuje to ruch granulek zawierających beta-heksozaminidazę na powierzchnię komórki, uwalniając ją do roztworu.
Odwirować płytkę w celu osadzenia komórek i przenieść supernatant zawierający enzym do pustego dołka świeżej płytki. Potraktuj osady komórkowe buforem do lizy w celu lizy komórek i uwolnienia ich zawartości do lizatu, w tym wewnątrzkomórkowej beta-heksozaminidazy.
Dodaj lizat zawierający enzym do innego dołka na tej samej płytce wielodołkowej. Potraktuj obie studzienki substratem enzymu, p-nitrofenylo-acetylo-D-glukozaminą i inkubuj. Enzymy hydrolizują substraty, uwalniając p-nitrofenole — k
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych