JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:02 min. • July 8th, 2025
Pułapki zewnątrzkomórkowe neutrofili lub NET to przypominające sieć struktury włókien chromatyny skompleksowane z białkami przeciwdrobnoustrojowymi, które zatrzymują i neutralizują patogeny. NET są wydzielane przez neutrofile — komórki odpornościowe, które przechowują białka przeciwdrobnoustrojowe w wyspecjalizowanych ziarnistościach cytoplazmatycznych.
Aby zbadać tworzenie NET in vitro, należy pobrać zawiesinę izolowanych neutrofili. Dodaj octan mirystynianu forbolu lub PMA - lipofilowy związek prozapalny. Płytki komórek i inkubować.
PMA przenika przez błonę neutrofili i dostaje się do cytoplazmy, gdzie wiąże się i aktywuje kinazę białkową C lub PKC.
Aktywowany PKC indukuje dalszą sygnalizację w celu fosforylacji cytoplazmatycznych składników oksydazy NADPH - kompleksu enzymatycznego - powodując jego gromadzenie się na błonie plazmy i ziarnistości. Kompleks wytwarza reaktywne formy tlenu lub ROS.
ROS powodują uwalnianie proteaz i białek przeciwdrobnoustrojowych z granulek. Granulowane proteazy wraz z enzymami cytrulinacji aktywowanymi przez ROS przemieszczają się do jądra.
Granulowane proteazy powodują częściową degradację histonów, podczas gdy enzymy cytrulinacji promują cytrulin
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych