System hodowli narządów jelitowych ex vivo do badania interakcji między gospodarzem a mikrobiotą

Aby zbadać interakcje między gospodarzem a mikrobiotą jelitową ex vivo, należy zacząć od mysiej tkanki jelita grubego wolnej od określonych bakterii kolonizujących jelita. Przepłukać tkankę pożywką w celu usunięcia kału i przenieść na płytkę wielodołkową zawierającą odpowiednią pożywkę.

Równolegle należy zmontować wielodołkowe urządzenie do hodowli narządów jelitowych ex vivo.

Każda studzienka urządzenia składa się z dwóch sparowanych portów wejściowych i wyjściowych - pierwszy łączy się ze światłem okrężnicy, a drugi zapewnia ciągłe dostarczanie pożywki do studzienek w celu utrzymania żywotności tkanek.

Przenieś tkankę do urządzenia. Podłącz bliższy i dalszy koniec okrężnicy do pierwszej pary portów wejściowych i wyjściowych. Rozpocznij przepływ stymulantu światła do światła okrężnicy, a przepływ medium do studzienki.

Stymulant zawiera bakterie kolonizujące jelita, które wydzielają enzymy rozkładające warstwę śluzu, umożliwiając im przyczepianie się do leżących poniżej komórek nabłonka. To aktywuje kaskadę sygnalizacyjną, która pobudza rezydentne komórki dendrytyczne do rozszerzania swoich dendrytów między komórkami nabłonkowymi, wychwytując antygeny bakteryjne i generując specyfi