JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:08 min. • July 8th, 2025
W przypadku interakcji ze stymulantami stanu zapalnego komórki odpornościowe uwalniają cząsteczki sygnalizacji zapalnej - cytokiny - w celu wytworzenia odpowiedzi immunologicznej.
Aby przeanalizować wpływ preparatów wyrobów tytoniowych, TPP, należy pobrać płytkę wielodołkową o rosnących stężeniach TPP. Wysiewaj płytkę ludzkimi komórkami jednojądrzastymi krwi obwodowej, PBMC zawierającymi komórki odpornościowe.
Nikotyna – środek immunosupresyjny w TPP – wiąże się z nikotynowymi receptorami acetylocholiny, zmniejszając produkcję cytokin prozapalnych. Ta regulacja w dół jest zależna od dawki, przy czym wyższe stężenia mają bardziej znaczący wpływ.
Odwirować w celu osadzenia komórek i odrzucenia supernatantu zawierającego pozostałości TPP.
Ponownie zawiesić komórki w kompletnym pożywce i dodać mieszankę zawierającą lipopolisacharyd - stymulator odporności i GolgiPlug - inhibitor transportu białek.
Cząsteczki lipopolisacharydu oddziałują z komórkami odpornościowymi zawierającymi receptor toll-like 4, uruchamiając wewnątrzkomórkowe szlaki sygnałowe i produkcję cytokin prozapalnych. Tymczasem cząsteczki GolgiPlug blokują wydzielanie cytokin z aparatu Golgiego, umożliwiając ich akumulację.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych