JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:23 min. • July 8th, 2025
Wirus Drosophila C lub DCV, dodatni jednoniciowy wirus RNA, często infekuje Drosophila melanogaster.
Podczas infekcji DCV wykorzystuje maszynerię komórek gospodarza do replikacji genomu wirusa, ostatecznie wytwarzając cząsteczki wirusa. Zainfekowane komórki wykazują działanie cytopatyczne, CPE i ulegają lizie lub umierają bez lizy z powodu niezdolności do podziału.
Aby określić średnią dawkę infekcyjną w hodowli tkankowej wirusa, stężenie DCV, przy którym połowa zakażonych komórek wykazuje CPE, należy rozpocząć od seryjnie rozcieńczonych zawiesin DCV.
Przenieść na płytkę wielodołkową zawierającą częściowo przylegające komórki Drosophila S2* pochodzące z zarodków Drosophila melanogaster w późnym stadium rozwoju, naturalnego gospodarza DCV. Studzienki zawierające pożywkę i komórki służą jako kontrole negatywne.
Inkubuj, aby wirus zainfekował komórki. Komórki zakażone wirusem wykazują CPE poprzez uszkodzenie i śmierć komórki. Po inkubacji obserwuj studzienki pod mikroskopem.
Zidentyfikuj dołki dodatnie i ujemne CPE w różnych rozcieńczeniach. Należy zastosować odpowiednią metodę w celu oznaczenia średniej dawki infekcyjnej DCV w hodowli tkankowej wirusa.
Aby określić średnią dawkę infe
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych