JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:25 min. • July 8th, 2025
W mikrośrodowisku nowotworu aktywowane neutrofile uwalniają zewnątrzkomórkowe pułapki neutrofili lub NET, złożone z zewnątrzkomórkowych włókien DNA, histonów i białek ziarnistych, które odgrywają kluczową rolę w progresji raka.
Aby zbadać adhezję komórek rakowych do NET in vitro, dodaj zawiesinę NET do studzienek wielodołkowych. Inkubuj w celu utworzenia monowarstwy NET.
Po inkubacji usuń niezaległe sieci NET.
Dodaj roztwór białkowy, aby zablokować wolne miejsca wiązania w studzienkach.
Pipeta znakowała fluorescencyjnie komórki rakowe na monowarstwach NET.
Specyficzne receptory powierzchniowe na komórkach nowotworowych oddziałują z NET, ułatwiając adhezję komórek.
Po inkubacji wyrzucić pożywkę z dołka kontroli ujemnej.
Dodaj dezoksyrybonukleazę, aby zdegradować NET, odłączając komórki.
Usuń roztwory z kontroli ujemnej i studzienek testowych. Użyj buforu, aby usunąć nieprzylegające komórki.
Przymocuj przylegające komórki rakowe do NET za pomocą formaldehydu.
Za pomocą mikroskopu fluorescencyjnego wizualizuj fluorescencyjne komórki rakowe przylegające do NET.
Studzienki testowe wykazują znaczną adhezję komórek rakowych do NET, podczas gdy NET traktowane deoksyrybonukleazą wykazują ob
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych