JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 2:51 min. • July 8th, 2025
Umieść mysz w zdezynfekowanej komorze, aby zapewnić sobie dostęp do jej ogona.
Zabezpiecz komorę, aby zminimalizować ruchy myszy.
Wysterylizuj ogon i znieczul go.
Za pomocą ostrych nożyczek chirurgicznych odetnij niewielką część z czubka ogona myszy, który zawiera sieć naczyń krwionośnych.
Ta procedura obcinania ogona umożliwia pobranie niewielkiej objętości krwi obwodowej.
Zbierz krew do heparynizowanej rurki kapilarnej, wykorzystując działanie kapilarne probówki. Heparynizowana rurka pomaga zapobiegać krzepnięciu krwi.
Za pomocą strzykawki z gruszką przenieś krew do probówki pokrytej EDTA.
Odwróć probówkę w celu prawidłowego wymieszania krwi z EDTA, antykoagulantem. EDTA wiąże jony wapnia we krwi, zapobiegając krzepnięciu.
Odwirować probówkę, aby oddzielić osocze od komórek krwi.
Zebrać i przenieść górną warstwę zawierającą osocze do świeżej probówki.
Przechowuj probówkę w niższych temperaturach, aby zachować integralność komponentów plazmy.
Aby pobrać próbkę krwi obwodowej, najpierw delikatnie umieść mysz w zdezynfekowanym ograniczniku dla małych zwierząt i zabezpiecz rurkę, aby zminimalizować ruchy zwierzęcia.
Następnie wyszoruj ogon świeżym alkoholem izopropylowym, a następnie nałóż miejscowy krem znieczulający.
Używając bardzo ostrych nożyczek chirurgicznych, odetnij około 0,5 do 1 milimetra od czubka ogona i zbierz około 80 mikrolitrów krwi obwodowej do heparynizowanych kapilarek.
Użyj strzykawki z gruszką, aby przenieść próbki krwi do znakowanej probówki mikrotainera potasu-EDTA i odwróć probówkę 20 razy, aby zapobiec krzepnięciu.
Po odwirowaniu probówek do pobierania krwi zgodnie z instrukcjami producenta, ostrożnie zbierz warstwę osocza i przechowuj porcje w temperaturze minus 20 stopni Celsjusza, a następnie podwielokrotność osocza do przechowywania w temperaturze minus 20 stopni Celsjusza.