Test oparty na przepływie laminarnym do badania interakcji między leukocytami a komórkami śródbłonka

Rozpocznij od umieszczenia szklanego szkiełka z przylegającą monowarstwą śródbłonka stymulowaną cytokinami w komorze przepływowej.

Te komórki śródbłonka wyrażają cząsteczki adhezyjne powierzchniowe, takie jak selektyny, i sygnały migracyjne związane ze śródbłonkiem, takie jak chemokiny.

Wprowadzić znakowane fluorescencyjnie leukocyty do komory przepływowej.

Gdy leukocyty przepływają przez monowarstwę śródbłonka, angażują się w aktywowane komórki śródbłonka.

Selektyny na komórkach śródbłonka wiążą się z odpowiadającymi im ligandami na leukocytach.

Oddziaływania selektoryna-ligand są słabe i przejściowe, co umożliwia leukocytom toczenie się wzdłuż monowarstwy śródbłonka pod wpływem siły przepływającego pożywki.

Rolowanie pozwala leukocytom na interakcję z chemokinami, aktywując integryny i sprzyjając mocnemu zatrzymaniu leukocytów.

Następnie leukocyty rozprzestrzeniają się po monowarstwie śródbłonka, co wskazuje na ich potencjał do transmigracji, co jest kluczowym krokiem w odpowiedzi immunologicznej.

Test ten pomaga badać mechanizm adhezji, deadhezji i transmigracji leukocytów podczas perfuzji nad komórkami śródbłonka.

Użyj jednego mikromola zielonego fluorescencyjnego barwnika kwas