Analiza turbidymetryczna w celu monitorowania indukowanej kolagenem agregacji wstępnie leczonych ludzkich płytek krwi
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 5:42 min. • July 8th, 2025
Zacznij od szklanych kuwet zawierających wstępnie obrobioną, ludzką zawiesinę płytek krwi zawierającą nieaktywowane płytki krwi i fibrynogeny - glikoproteinę osocza.
Kuwety zawierają urządzenie mieszające do równomiernego mieszania.
Umieść kuwetę kontrolną w agresometrze, który mierzy agregację, oceniając zmętnienie.
Wprowadź kolagen — agonistę agregacji płytek krwi, oddziałującego z receptorami powierzchniowymi płytek krwi i aktywującego kaskady sygnalizacyjne w dalszej kolejności.
Powoduje to uwalnianie ATP przez kanał Pannexin 1 - kanał powierzchniowy płytek krwi, inicjujący aktywację płytek krwi i zmianę kształtu, co prowadzi do zagłębienia w krzywej agregacji.
Fibrynogen dodatkowo sieciuje płytki krwi, promując agregację płytek krwi indukowaną kolagenem, zmieniając zmętnienie i powodując stopniowy wzrost krzywej agregacji.
Do kuwety testowej należy poddawać się działaniu inhibitora kanału Pannexin 1 o wysokim stężeniu, który blokuje ten kanał.
Dodaj kolagen do kuwety. Interakcje z inhibitorami zapobiegają uwalnianiu ATP i utrudniają agregację płytek krwi indukowaną kolagenem, co jest widoczne w niezmienionym zmętnieniu i płaskiej krzywej agregacji.
Aby przygotować osocze bogat
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych