JoVE Encyclopedia of Experiments
Immunologia
0 wyświetleń • 2:39 min • July 8th, 2025
Weź komórki raka prostaty i wstrzyknij je podskórnie znieczulonej, nagiej myszy z obniżoną odpornością.
Brak odpowiedzi immunologicznej pozwala wstrzykniętym komórkom przetrwać i namnażać się, tworząc guz.
Komórki nowotworowe nadmiernie eksprymują antygen błonowy specyficzny dla prostaty lub PSMA, białko powierzchniowe komórki.
Weź przeciwciała specyficzne dla PSMA sprzężone z radioznacznikiem i wstrzyknij je dożylnie w ogon myszy z guzem.
Przeciwciała docierają do komórek nowotworowych i wiążą się z PSMA, znakując guz.
Umieść znieczuloną mysz w pozytonowej tomografii emisyjnej lub skanerze PET i uzyskaj skan.
Uzyskany obraz przedstawia rozmieszczenie radioznacznika, podkreślając obszary o wysokim wychwycie przeciwciał, które odpowiadają lokalizacji guza.
U samców nagich myszy atymicznych wszczepia się podskórnie 5 x 106 komórek raka prostaty LNCaP, pozwalając im urosnąć do ksenoprzeszczepu o wielkości od 100 do 150 milimetrów sześciennych. Trzy do czterech tygodni po inokulacji guzy powinny być gotowe.
Do obrazowania rozcieńczyć radioimmunokoniugat 89Zr-DFO-J591 do stężenia 1 milikiurów na mililitr w 0,9% sterylnym roztworze soli fizjologicznej. Następnie wstrzyknąć 200 mikrolitrów roztworu 89Zr-DFO-J591 do bocznej żyły ogonowej myszy z ksenograftem.
W żądanym punkcie czasowym obrazowania znieczul mysz 2% mieszaniną izofluranu i tlenu. Umieść mysz na łóżku skanera PET dla małych zwierząt. Sprawdź znieczulenie metodą szczypania palców u nóg i nałóż maść weterynaryjną na oczy myszy, aby zapobiec wysuszeniu podczas znieczulenia.
Utrzymuj znieczulenie podczas skanowania za pomocą 1% mieszaniny izofluranu i tlenu. Następnie należy pozyskać dane PET dla myszy za pomocą skanowania statycznego z co najmniej 40 milionami zbiegających się zdarzeń przy użyciu okna energetycznego od 350 do 700 kiloelektronowoltów i okna czasowego koincydencji wynoszącego sześć nanosekund.