JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 2:02 min. • July 8th, 2025
Zacznij od płytki hodowlanej zawierającej odlew agarozy. Odlew składa się z komory wysiewającej z wieloma mikrostudzienkami.
Każda mikrostudzienka zawiera sferoidę guza w pożywce hodowlanej. Sferoidy są trójwymiarowymi agregatami komórek nowotworowych.
Najpierw usuń podłoże otaczające odlew agarozy. Następnie usuń podłoże z odlewu z jednego rogu komory wysiewającej, aby uniknąć utraty sferoid.
Wprowadzić zawiesinę limfocytów T specyficznych dla nowotworu kroplami do komory wysiewu, umożliwiając komórkom osadzenie się w mikrodołkach zawierających sferoidy.
Następnie dodaj pożywkę hodowlaną wokół odlewu agarozy i inkubuj płytkę w warunkach fizjologicznych, aby rozwinąć kokulturę.
Podczas inkubacji limfocyty T otaczają sferoidę. Podzbiór limfocytów T infiltruje sferoidę, podczas gdy inne pozostają na obrzeżach, tworząc trójwymiarowy model kokultury.
Aby ustanowić kohodowlę limfocytów T, należy ponownie zawiesić odpowiednią liczbę limfocytów T w 190 mikrolitrach odpowiedniej pożywki do hodowli komórek T na dołek i przechylić 12-dołkową płytkę, aby umożliwić usunięcie pożywki do hodowli komórkowej otaczającej odlaną agarozę najpierw, a następnie w komorze wysiewu, bez usuwania sferoid.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych