Test do oceny działania przeciwnowotworowego supernatantu bezkomórkowego Lactobacillus
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 1:49 min. • July 8th, 2025
Weź wielodołkową płytkę zawierającą sferoidy raka jelita grubego w pożywce wzrostowej.
Sferoidy to trójwymiarowe agregaty komórek rakowych, które przypominają fizjologiczne mikrośrodowisko guza.
Usunąć pożywkę wzrostową i dodać rosnące stężenie bezkomórkowego supernatantu Lactobacillus lub LCFS, supernatantu hodowli uzyskanego z kultury Lactobacillus, bakterii przewodu pokarmowego.
LCFS jest pozbawiony komórek bakteryjnych, ale zawiera aktywne metabolity o działaniu przeciwnowotworowym wydzielane przez bakterie.
Metabolity bakteryjne w LCFS oddziałują z komórkami nowotworowymi w sferoidzie, indukując apoptozę i prowadząc do śmierci komórki.
Uszkodzenie komórek powoduje zaburzenie morfologii sferoidów.
Za pomocą mikroskopu zbadaj sferoidy poddane działaniu LCFS, aby zaobserwować wzrost śmierci komórek wraz ze wzrostem stężenia LCFS, wskazując na zależną od dawki aktywność przeciwnowotworową metabolitów bakteryjnych.
W przypadku leczenia LCFS należy seryjnie rozcieńczyć przygotowany rozmrożony roztwór podstawowy LCFS w świeżej pożywce wzrostowej do stężeń 25%, 12,5 i 6% i użyć pipety o pojemności 200 mikrolitrów, aby ostrożnie usunąć jak najwięcej supernatantu z każdej studzienki z p
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych