JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 2:43 min. • July 8th, 2025
Zacznij od zamrożonego roztworu polimeru zawierającego dodatnio naładowane polimery.
Rozmrozić roztwór polimeru, aż osiągnie temperaturę pokojową.
Dodaj bufor i wir, aby uzyskać równomierne mieszanie, generując jednorodny roztwór.
Wprowadź docelowe mRNA do roztworu polimeru w równym stosunku, aby uzyskać optymalną reakcję.
Inkubuj, aby umożliwić dodatnio naładowanym polimerom interakcję z ujemnie naładowanymi grupami fosforanowymi w mRNA poprzez oddziaływania elektrostatyczne.
Ułatwia to wbudowywanie mRNA w strukturę polimeru, tworząc nanocząstki kompleksów mRNA-polimer lub polipleksów.
Przenieś te polipleksy do probówki zawierającej wodę wolną od RNaz.
Wymieszaj je i pozwól na wytrącenie się polipleksów.
Wprowadzić bufor zawierający sacharozę i zamrozić go. Sacharoza działa jako krioprotektant, który utrzymuje integralność strukturalną polipleksów.
Następnie wykonaj liofilizację, aby usunąć wszelkie ślady wody.
Przechowuj go w niskiej temperaturze jako kandydata na szczepionkę mRNA do wykorzystania w przyszłości.
W celu wytworzenia polipleksów należy rozmrozić wcześniej przygotowane polimery peptyd C-6 poli-beta aminoestry i odwirować roztwór. Po odpipetowaniu mieszaniny polimerow
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych