Generowanie komórek neuronalnych z pluripotencjalnych komórek macierzystych pochodzenia krwionośnego
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:18 min. • July 8th, 2025
Weź mikropłytkę ze szklanymi szkiełkami nakrywkowymi umieszczonymi na dnie studzienek.
Wprowadzić dodatnio naładowany polimer, aby pokryć szkiełka nakrywkowe i umyć, aby usunąć wszelkie niezwiązane polimery. Potraktuj białkiem macierzy zewnątrzkomórkowej, aby pokryć szkiełka nakrywkowe i odessać niezwiązane białka.
Powłoka działa jak substrat hodowlany, który ułatwia adhezję komórek.
Dodaj pożywkę indukcyjną do studzienek i wprowadź zawiesinę pluripotencjalnych komórek macierzystych pochodzących z krwi lub BD-PSC. Komórki te, zdolne do różnicowania się w różne typy komórek, są generowane poprzez przeprogramowanie komórek progenitorowych krwi.
Inkubuj, aby komórki przylegały do podłoża. Czynniki wzrostu i składniki odżywcze w pożywce indukcyjnej przekształcają BD-PSC w neuronalne komórki progenitorowe.
Wprowadzić pożywkę różnicującą zawierającą neuronalne czynniki wzrostu i inkubować, wywołując różnicowanie progenitorów nerwowych w fenotyp neuronalny, wykazujący rozszerzone procesy komórkowe i kontakty komórka-komórka.
Umieść szklane szkiełka nakrywkowe na płytkach 4-dołkowych i pokryj je 1-5 rozcieńczonymi poli-L-ornityną w podwójnie destylowanej wodzie. Po inkubacji szkiełek nakry
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych