Współhodowla brzusznego hipokampa i jądra półleżącego

Zacznij od pourodzeniowej sekcji koronalnej mózgu myszy zawierającej brzuszny obszar hipokampa, obszar w dolnej części mózgu.

Przeciąć brzuszną tkankę hipokampa i przenieść ją do odpowiedniego podłoża.

Pokrój tkankę na mniejsze kawałki i pozwól im przymocować się do szkiełka nakrywkowego pokrytego matrycą w płytce wielodołkowej.

Neurony z tkanki zaczynają wydłużać projekcje.

Następnie weźmy jądro półleżące pochodzące z zarodka myszy, małą tkankę głęboko wewnątrz przodomózgowia.

Pokrój tkankę jądra półleżącego na małe kawałki. Przenieś je do tuby.

Dodaj enzymy trawiące, aby zdysocjować białka macierzy zewnątrzkomórkowej. Umyj, aby obniżyć poziom enzymów.

Pipetuj kawałki tkanki w górę i w dół, aby wygenerować pojedyncze komórki.

Odwirować komórki. Usunąć supernatant i ponownie zawiesić komórki.

Dodać tę zawiesinę do szkiełka nakrywkowego z brzusznymi tkankami hipokampa i rozpocząć inkubację.

Zakończenia nerwowe z brzusznego fragmentu tkanki hipokampa łączą się z komórkami neuronalnymi jądra półleżącego, tworząc połączenie komunikacyjne zwane synapsą.

Przed pobraniem tkanek należy wstępnie inkubować 12-milimetrowe szkiełka nakrywkowe z powłoki szklanej laminowanej poli-D-lizyną na 24-