Ustanowienie wspólnej hodowli komórek miazgi zębowej i neuronów trójdzielnych do komunikacji krzyżowej
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 6:13 min. • July 8th, 2025
Zacznij od mezenchymalnej zawiesiny bogatej w komórki macierzyste uzyskanej z tkanki miazgi zębowej myszy.
Inkubować, aby umożliwić adhezję i proliferację komórek, tworząc monowarstwę.
Umieść porowatą wkładkę membranową pokrytą lamininą w studzience zawierającej komórki miazgi zębowej.
Zasiej wkładkę pożywką do kohodowli zawierającą neurony trójdzielne pochodzące z mózgu myszy. Inkubuj, aby umożliwić przyczepienie neuronów.
Zastąp pożywkę pożywką do kohodowli zawierającą regulatory wzrostu, takie jak urydyna i 5-fluoro-2 deoksyurydyna.
Cząsteczki te wnikają do komórek i kontrolują wzrost aktywnie proliferujących mezenchymalnych komórek macierzystych poprzez hamowanie syntezy DNA.
Z biegiem czasu komórki mezenchymalne wydzielają małe cząsteczki sygnałowe, które przechodzą przez porowatą błonę, aby stymulować neurony trójdzielne.
Ta stymulacja powoduje, że procesy neuronalne neuronów trójdzielnych wydłużają się w kierunku komórek mezenchymalnych. Dodatkowo neurony wydzielają cząsteczki sygnałowe, umożliwiające komunikację krzyżową.
Po eutanazji myszy umieść głowę na jednorazowym podkładzie, tak aby usta były skierowane w stronę sufitu, a podstawa szyi leżała płasko na powierzchni rob
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych